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动物细胞工程是以动物细胞为对象，通过工程技术手段对细胞的遗传与生理特性进行改良和修饰，从而获得人类所需要的产物或器官乃至个体的生物技术。 动物细胞工程技术涉及动物组织、细胞以及胚胎操作的相关技术。 第一节 动物细胞工程的主要领域及意义 一. 单克隆抗体技术与现代医学 单克隆抗体技术是用骨髓瘤细胞(myeloma cell)与经特定抗源免疫刺激的B淋巴细胞(antigen stimulated B lymphoblast)融合得到杂交瘤细胞(hybridoma cell)，杂交瘤细胞既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖，又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。因此，单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术(hybridoma technology)。 单克隆抗体具有高度的特异性与灵敏性，可提高疾病诊断准确性。 单克隆抗体疫苗，可增加疫苗安全性。 单克隆抗体用于某些肿瘤治疗。 单克隆抗体技术还可广泛用于各种基础医学研究。 二. 胚胎工程与畜牧业 利用胚胎技术可以以工厂形式大批量生产优质胚胎，从而可以降低胚胎成本，扩大移植胚的来源，使农畜动物胚胎移植的推广应用成为可能。 四. 动物克隆技术的有益应用 动物克隆技术至少在以下几个方面具有广阔的应用前景：? 保存优良的动物品种； 拯救濒临灭绝的珍惜动物； 利用克隆动物工厂生产蛋白质药物，发展新型的医药工业； 利用克隆技术生产人体器官，扩大器官移植所需的器官来源。 第二节 培养条件下动物细胞特性 一. 动物细胞与植物细胞比较 动物细胞的表面由质膜包被着，质膜控制着细胞内外物质的运输。质膜与细胞内部的膜系统、内质网、高尔基体和核膜等都相联。 植物细胞外面有细胞壁，而细胞之间有一层胶状物即胞间层（middle lamella）将两个细胞粘合在一起，在两个相邻细胞之有胞间连丝（plasmadesma）使细胞间相互流通。 动物细胞的细胞质中溶酶体（lysosomes）较发达，同时还含有许多酶原粒。 而植物细胞中则含有较多的质体(plastid)，包括叶绿体(chloroplast)、白色体（leucoplast）和杂色体(chromoplast)。 二. 培养条件下动物细胞生长特性 在活体内，动物细胞在胚胎期即已高度分化，而且这种分化是不可逆转的。 活体内的动物细胞按照分裂能力可以分为三大类： 第一类是能保持继续分裂能力的细胞-干细胞，可以继续不断地分裂，如骨髓干细胞、各类前体细胞； 第二类细胞群是永久失去分裂能力的细胞，如各类高度特化的细胞； 第三类是静止细胞群，即所谓的G0细胞，在正常情况下，它们不分裂，也不合成DNA，但在受到刺激后，则重新进入细胞分裂。如人的肝脏细胞等。 第一类和第三类细胞在适当条件下可进行离体培养。 二. 培养条件下动物细胞生长特性 离体培养的动物细胞可分为： 贴壁依赖型：包括成纤细胞型、上皮细胞型 非贴壁依赖型：悬浮型细胞，如血液、淋巴组织的细胞 兼性贴壁细胞：如中国地鼠卵巢细胞、小鼠L929细胞 三. 培养条件下动物细胞的生理特点 1. 动物细胞的分裂周期长 动物细胞分裂周期一般为12～48小时，它不仅随细胞种属的不同而有差异，即使是同一种属，不同部位的细胞所需的时间也不同。此外，培养条件如温度、pH、培养基的成分等，也会影响分裂周期的长短。 2．接触抑制(contact inhibition)现象 3．有限细胞系和永久细胞系 3．有限细胞系和永久细胞系 3．有限细胞系和永久细胞系 4．动物细胞的环境敏感性 第三节 动物细胞培养的环境与营养要求 一. 动物细胞培养的环境要求 1. 温度 温度是细胞体外生存的基本条件之一，来源不同的细胞，其最适生长温度不尽相同 如昆虫细胞培养温度一般是25～28℃ 哺乳动物细胞的培养温度一般是37℃。 总体上讲，动物细胞忍受低温的能力比忍受高温的能力强。如哺乳低温细胞在45℃下只能存活1小时，但在25℃条件下仍然能慢速生长，并维持长时间不死，甚至在4℃下数小时后，再置于适宜温度下细胞仍然可以正常生长。 2. pH 3. 溶氧及气体环境 4. 渗透压 二. 动物细胞培养的营养要求 1. 天然培养基 天然培养基是使用最早、最为有效的动物细胞培养基，它主要取自于动物体液或从动物组织分离提取，其优点是营养成分丰富、培养效果好；缺点是成分复杂、个体差异大、来源有限。 天然培养基的种类很多，主要包括生物性体液（如血清）、组织浸出液（如胚胎浸出液）、凝固剂（如血浆）、水解乳蛋白等。 2. 合成培养基 目前用于动物细胞培养的合成培养基种类很多，一般均包含氨基酸、维生素、糖类、无机离子和其它辅助成分。 尽管各种合成培养基给细胞培养带来极大方便，但许多实验表明，单纯使用合成培养基细胞的贴壁、增殖效果常常不理想。因此，在使用时通