制作泡菜并检测亚硝酸盐含量(第二课时)解读.ppt

3、步骤 比色 测定反应原理总结 酸化：对氨基苯磺酸溶于盐酸中 配制盐水 清水与盐按4:1的比例配制好后煮沸冷却。 封坛发酵 盖好坛盖。在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌所需的无氧环境。 在发酵过程中，要注意经常补充水槽中的水。 1、泡菜的制作过程中，许多乳酸菌产生大量乳酸，共同抑制其它菌的生长，乳酸积累过多，又会抑制乳酸菌自身的生长，以上体现出的生物关系依次是 A．种内互助、种内斗争、种间斗争 B．种内互助、种间斗争、种内斗争 C．种内斗争、种间斗争、种内互助 D．种间斗争、种内斗争、种内互助 答案 你给出此建议的理由是：食盐浓度为3％的泡菜中亚硝酸盐含量总体上是3坛泡菜中最高；食盐浓度为5％的泡菜中亚硝酸盐含量变化最快，它的最高值是三坛中最高的，说明乳酸菌代谢最旺盛，但从发酵11天后亚硝酸盐降到最低值；而食盐浓度为7％的泡菜中亚硝酸盐含量变化不大，虽一直处于较低数值，但容易成为咸腌菜。（3分） * 四、亚硝酸盐含量的测定 [资料二] 测定亚硝酸盐含量的原理 在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与（对氨基苯磺酸）发生重氮化反应后，与（N－1－萘基乙二胺盐酸盐）结合生成玫瑰红溶液。将经过反应显色后的待测样品与已知浓度的标准液进行目测比色，即可大致估算出样品中的亚硝酸盐含量。 比色法 （1）配置溶液 （2） 配制标准液 （3） 制备泡菜样品处理液 （4）比色 1.配制溶液 对氨基苯磺酸溶液： 称取0.4克对氨基苯磺酸，溶解于100ml体积分数为20％的盐酸中，避光保存(4mg/ml)。 N－ 1－萘基乙二胺盐酸盐溶液： 称取0.2克N-1－萘基乙二胺盐酸盐，溶解于100ml的水中，避光保存(2mg/ml) 。 亚硝酸钠溶液： 称取0.10克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠，用水溶解至500ml，再转移5 ml溶液至200 ml容量瓶，定容至200ml(5ug/ml)（如何计算） 提取剂：分别称取50克氯化镉、氯化钡，溶解于1000ml蒸馏水中，用盐酸调节pH至1。 氢氧化铝乳液和2.5mol/l的 氢氧化钠溶液。 2、 配制标准显色液 用移液管吸取0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL亚硝酸钠溶液(相当于1ug，2ug，3ug，4ug，5ug和7.5ug亚硝酸钠)，分别置于50mL比色管中，再取1支比色管作为空白对照。 并分别加入2.0mL对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3～5分钟后； 再分别加入1.0mL N-1－萘基乙二胺盐酸盐溶液，加蒸馏水至50mL，混匀； 观察亚硝酸钠溶液颜色的梯度变化（玫瑰红色逐渐加深）。 3. 制备样品处理液 样品处理液的制备 增加亚硝酸盐的溶解度 中和乳酸 吸附杂质，脱色，净化作用 3. 制备样品处理液 3. 制备样品处理液（注意：所加液体和程序） 1将3坛泡菜做好标记后，分别称取0.4千克泡菜，用榨汁机粉碎，过滤得到约200ml汁液。 2取其中100 ml转移至500ml容量瓶中，加200ml蒸馏水、 100ml提取剂（增加亚硝酸盐溶解度，利于亚硝酸亚提取），在摇床上振荡提取1h ，再加入40ml氢氧化钠溶液（中和过多的乳酸，制造弱碱环境），用蒸馏水定容至500ml后，立即过滤。 3将60ml滤液转移至100ml容量瓶中，加入氢氧化铝乳液（制备的氢氧化铝胶体能吸附泡菜汁液中的杂质，使泡菜汁透明澄清，以便进行后续的显色反应。），定容至100ml，过滤。此时，滤液变得无色透明。得样品处理液。 样品即滤液加入比色管 显色反应：先加对氨基苯磺酸 ，后加 N-1－萘基乙二胺盐酸盐 比色：显色后与标准显色液对比，找出颜色最相近的记录对应亚硝酸盐含量 重氮化：亚硝酸盐+对氨基苯磺酸 重氮盐 酸 显色：重氮盐+