第十六章RNA的代谢范例.ppt

Chapter 16 RNA Metabolism ● 转录（transcription） ● 转录单位（transcription unit） ● 对称转录和不对称转录 ● RNA聚合酶（RNA polymerase，RNA pol） ● 启动子（promoter） ● 终止子（terminator） ● RNA复制酶（RNA replicase） ● 反转录（reverse transcription） §6 核 酶 真核mRNA的5’－“帽子”加工 2.mRNA3’-“尾巴”的加工 ●在真核及病毒 mRNA 的 3’ 端存在加尾信号 AAUAAA 。内切酶在加尾信号后 11～30 位置切断 mRNA ，然后由多聚腺苷酸聚合酶添加 150～ 200 b长度的AAAAAA…… ●成熟mRNA的polyA长度为20～200, 加尾在细胞核内完成。 ●polyA不能阻止3’外切酶的水解作用，因此时间越长，polyA越短。那么polyA越长，mRNA的寿命就越长。ployA尾巴长度决定了mRNA的寿命。 三、不同RNA拼接方式导致一个基因多种产物 降钙素 甲状腺 脑 降钙素基因相关肽 真核生物复杂转录产物的两种不同的剪接方式 四、rRNA和tRNA前体的转录后加工 1. 原核生物rRNA的转录后加工 不依赖ρ-因子的终止子的终止反应 依赖ρ因子和不依赖ρ因子终止的区别 不富含AT （RNA无多聚U现象） 不富含GC 依赖ρ因子的终止子 富含AT 富含GC 不依赖ρ因子的终止子 回文结构后序列 回文结构序列 终止类型 §4 真核细胞的RNA聚合酶 同样，真核 RNA 聚合酶无校对功能。 - 高浓度抑制 tRNA，5 S rRNA 核质 Ⅲ ~ 700 000 低浓度抑制 hnRNA，snRNA 核质 Ⅱ 500 000 ~ 700 000 对酶的作用 不抑制 rRNA （5.8 S、18 S、28 S） 核仁 I 分子量 α-鹅膏蕈碱 产物 分布 酶类 一、RNA聚合酶Ⅱ需要许多其它蛋白质因子 二、 RNA聚合酶和转录因子在启动子上的组装 RNA PolⅢ 上游启动子（核内小RNA的启动子） 下游启动子（内部启动子） 类别Ⅲ 启动子 RNA PolⅡ 基本启动子(7bp TATA框,-25～+30) initiator(起始位置处保守序列)、上游元件（－75位置，CAAT框）、应答元件（response element） 类别Ⅱ 启动子 RNA PolⅠ Core Promoter(决定位置,-45～+20) Upstream Control Element(-180～-107)(影响频率) 类别Ⅰ 启动子 RNA聚合酶 启动子名称 启动子 ● 真核生物的启动子由转录因子识别而不是σ因子； ● 转录因子的种类繁多，如通用因子、上游因子和可诱导因子。 ● 增强子：能增强基因转录的顺式作用元件（DNA序列）， 但没有启动子功能，存在位置不定。 ● 顺式作用元件：存在于DNA分子上的调控转录的序列。 ● 反式作用因子：能与顺式作用元件结合而调控转录的蛋白质 因子，如转录因子。 转录因子（TF）：RNA Pol起始转录需要的辅助因子 真核 hnRNA 的启动子由三部分组成：TATA盒、CAAT盒、GC盒 称上游因子，影响转录起始频率 －30区，解链位置，决定转录起点 三、RNA合成的起始 四、 RNA合成的延伸、终止和释放 五、RNA聚合酶Ⅱ活性的调节 六、DNA指导的RNA聚合酶能被选择性地抑制 RNA聚合酶抑制剂 ● 利福霉素：抑制细菌RNA聚合酶活性。利福平可以高效 抑制结核杆菌，杀死麻疯杆菌，在体外有抗病毒作用。 ● 利链霉素：与细菌RNA聚合酶?亚基结合，抑制转录过 程中RNA链的延长反应。 ● ?-鹅膏蕈碱：抑制真核生物RNA聚合酶活性。 §5 新生RNA的剪接和修饰 ● 大多真核生物基因是断裂基因，即含有内含子（intron）。 ● 断裂基因的转录产物必需通过拼接，去除插入部分（内含子），使编码区（外显子，exon）成为连续序列。这是基因 表达的重要环节。 ● 内含子的结构多种多样，拼接机制也是多种多样的。 断裂基因（split gene or interrupted gene）：编码蛋白质的基因中间被一些不能编码的核苷酸序列 — 插入序列或内含子所隔开，致使一个结构基因被断裂成若干部分，这样的基因被称为断裂基因。 ● 内含子（intron）：通常指基因中能被转录成前体转录物，但却不能成为mRNA组成成分的序列，也称插入序列或居间 序列（intervening sequence）。 ● 外显子（exon）：DNA 分子中编码 mRNA 某一部分序列的