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动物细胞工程学（第十二章） 第五节 细胞核移植技术 宋海林 动物细胞工程 动物细胞工程常用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 核移植定义： 就像克隆羊dolly 核移植是将供体细胞核移入去核的卵母细胞中，使后者不经精子穿透等有性过程即可被激活、分裂并发育，让核供体的基因得到完全复制。培养一段时间后，在把发育中的卵母细胞移植到人或动物体内的方法。核移植的细胞来源主要分为：供体细胞来源和受体细胞的来源两种。核移植主要用于细胞移植和异种器官移植，细胞移植可以治疗由于细胞功能缺陷所引起的各种疾病。 多莉 克隆猴 他们是如何产生的？ 卵细胞 B母绵羊 A母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 多莉羊的培育过程 融合后的卵细胞 动物体细胞核移植技术 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中。使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 克隆动物：用核移植方法得到的动物 1、为什么受体细胞要选用去核的卵母细胞？ 2、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉卵母细胞的核? 3、用于核移植的供体细胞一般都选择用传代10代以内的细胞，为什么？ 核移植技术分类 核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植（难度高） 继续思考 4、为什么体细胞核移植比胚胎核移植难度高？ 5、多莉羊的成功证明了什么？ 动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难 1、动物体细胞核具有全能性； 2、细胞质具有调控细胞核发育的作用。 供体细胞（供核） 细胞培养（取核） 体细胞核 卵巢卵母细胞（MⅡ中期：供质） 去核 去核卵母细胞 注入 细胞 融合 重组细胞 重组胚胎 胚胎移植 代孕母体 生出与供体遗传基础相同的动物 核移植过程 胚胎移植技术 试管动物（婴儿）培养过程 卵细胞 精子 体外受精 受精卵 胚胎 新个体 母体子宫内 孕育、产出 克隆动物的研究意义 1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病，作为供体 4.保护濒危动物 体细胞核移植技术存在的问题 1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。 2.成功率非常低及克隆动物食品的安全性问题。 现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。 1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出_______注入B品种牛的_________卵母细胞，经过某处刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为_______，将该胚胎移入代孕母牛的_______中，通过培育可达到目的。 细胞核 去核 重组胚胎 子宫 小试牛刀 2）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量______，为解决这一问题，可以用______激素处理B品种母牛。 3）克隆牛的产生说明_________具有全能性。克隆牛的性状主要表现____品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自______个亲本，细胞质来自______性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成______（相同，不同）。 不足 促性腺 动物体细胞核 A 两 雌 不同 小试牛刀 我国科学家2001年在山东莱阳农学院培育出克隆牛“康康”和“双双”的过程如图所示，请分析回答： （1） 所指细胞工程的名称分别是? 和 。 （2）“康康”和“双双”之间能否进行器官移植？为什么？ （3）实施细胞工程时，所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是？ （4）“康康”和“双双”的培育成功说明了什么问题？ 细胞核移植 胚胎移植 能。因为它们具有几乎完全相同的遗传物质，移植后不会发生免疫排斥 卵细胞体积大，易操作；卵细胞中含有能使细胞核的全能性表达的物质 动物细胞的细胞核也具有全能性 再接再厉