丙型肝炎实验诊断研究进展__培训课件.ppt

感染丙肝病毒后各指标检测时间表 抗-HCV “游离”抗原 早期检测 “筛查” “总”抗原 ■HCV RNA 11~13 days ■ HCV Ag 12~14 days ■ Anti-HCV = 70 days(3rd Gen) = 82 days(2nd Gen) 1 pg/ml 总HCV 核心抗原 = 8000 IU/ml HCV RNA HCV RNA 1 10 20 30 40 50 60 80 90 100 110 120 130 140 150 70 天 时间 灵 敏 度 0 10 20 30 40 50 60 检验原理 通过对血清或血浆样品进行预处理，解离HCV抗原/抗体复合物并释放出所有核心抗原，经固相包被特异性抗体捕获后，再与酶标记抗体形成双抗体夹心复合物，最后加入酶底物显色，以产品规定的可见光波长临界OD值判断HCV抗原检测结果。 HCV抗原ELISA基本原理 HCV抗体 抗 原 抗HCV抗体-HRP HRP 抗HCV体 酶 联 板 样本处理 不同亚型丙型肝炎病毒核心抗原的序列分析 10 20 30 40 50 60 ? HCV 1 MSTNPKPQRK TKRNTNRRPQ DVKFPGGGQI VGGVYLLPRR GPRLGVRATR KTSERSQPRG HCV 1b MSTNPKPQRK TKRNTNRRPQ DVKFPGGGQI VGGVYLLPRR GPRLGVRATR KTSERSQPRG HCV 2a MSTNPKPQRK TKRNTNRRPQ DVKFPGGGQI VGGVYLLPRR GPRLGVRATR KTSERSQPRG HCV 2b MSTNPKPQRK TKRNTNRRPQ DVKFPGGGQI VGGVYLLPRR GPRLGVRATR KTSERSQPRG HCV 3 MSTLPKPQRK TKRNTIRRPQ DVKFPGGGQI VGGVYVLPRR GPRLGVRATR KTSERSQPRG ? ? 70 80 90 100 110 120 HCV 1 RRQPIPKARQ PEGRTWAQPG YPWPLYGNEG CGWAGWLLSP RGSRPSWGPT DPRRRSRNLG HCV 1b RRQPIPKARQ PEGRTWAQPG YPWPLYGNEG MGWAGWLLSP RGSRPSWGPT DPRHRSRNLG HCV 2a RRQPIPKDRQ STGKSWGKPG YPWPLYGNEG CGWAGWLLSP RGSRPTWGPT DPRHRSRNLG HCV 2b RRQPIPKDRQ STGKSWGKPG YPWPLYGNEG LGWAGWLLSP RGSRPSWGPT DPRRRSRNVG HCV 3 RRQPIPKARQ SEGRSWAQPG YPWPLYGNEG CGWAGWLLSP RGSRPSWGPT DPRRRSRNLG ? 130 140 150 160 HCV 1 KVIDTLTCGF ADLMGYIPLV GAPLGGARRA LAHGVRVLED HCV 1b KVIDTLTCGF ADLMGYIPLV GAPLGGARRA LAHGVRVLED HCV 2a KVIDTLTCGF ADLMGYIPVV GAPVGGARRA LAHGVRVLED HCV 2b KVIDTLTCGF ADLMGYIPVV MAPLGGARRA LAHGVRVLED HCV 3 KVIDTLTCGF ADLMGYIPLV MAPVGGARRA LAHGVRALED 四株单抗亚型检定 1号(CAb-1) IgG2a 2号(CAb-2) IgG2a 3号(EAb-1) IgG2b 4号(EAb-2) IgG1 HCV-Ag和HCV-RNA检测的比较 HCV cAg HCV RNA 样本储存的条件要求 普通 特殊 样本的前处理试剂 不需要 需要 特殊仪器要求 无 有 实