体外诊断产品简介__培训课件.pptVIP

* 2.3 胶体金免疫层析试纸条 层析法技术优势:简单\现场\快速 1.打开包装取出试纸条 2.直接插入待测样品中 * 2.3 胶体金免疫层析试纸条-与常规诊断相比 优点 缺点 快速：全部检测过程仅需 3-10分钟。 简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专业人员，携带方便，可随时随地进行。 廉价：单个测试条成本极低 可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立刻拿到结果，不必等待。 稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。 检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾液，因而适合各种检查 定量问题 灵敏度问题 * 2.3 胶体金免疫层析试纸条-试纸条的组成 测试线 （T线） 控制线（C线） 胶体金垫 样品垫 NC膜（硝酸纤维素膜） 层析方向 PVC底板 有4个组分：⑴、吸水纸（样品垫）。⑵、玻璃纤维膜（胶体金垫）。膜上吸附着干燥的金标抗体（流动带）。⑶、硝酸纤维素膜，膜上包被着抗原或抗体条带和能与标记物直接起反应的质控物条带（检测带）。⑷、吸水纸。以上各组份首尾互相衔接。 * 2.3 胶体金免疫层析试纸条-检测原理 基本原理是将已知的特异性抗原或抗体固定于硝酸纤维素膜上某一区带作为检测带 在样品区滴加样品后，借助毛细作用，样品泳动至玻璃纤维膜，金标复合物溶解，并与样品进行抗原抗体反应，形成复合物，继续泳动至硝酸纤维素膜的检测区，带有金标记的复合物被检测区抗原或抗体捕获，呈现红色条带。如样品中没有待测抗原或抗体，则不发生结合，即不显色 在硝酸纤维素膜检测区附近一般再固定上针对金标结合物相应的抗原或抗体作为质控带，无论样品中有无待测物，质控线都应显示，如无，则检测失败。整个过程一般在15分钟内完成，操作简单、快速，且不需任何仪器。 * 2.3 胶体金免疫层析法-举例 （以HCG检测为例） HCG-β亚基抗体Y2，羊抗鼠二抗固定于硝酸纤维素膜上，金标HCG-α亚基单抗Y1固定于玻璃纤维素膜上。 * 2.4 蛋白芯片 * 2.4 蛋白芯片 蛋白质芯片是指固定于支持介质上的蛋白质构成的微阵列。 生 物 芯 片 基因芯片 蛋白质芯片 微流控芯片 * 2.4 蛋白芯片-检测原理 蛋白芯片技术的基本原理: 将各种蛋白质有序地固定于滴定板、滤膜和载玻片等各种载体上，然后，用标记了特定荧光的蛋白质或其他成分与芯片作用，经漂将未能与芯片上的蛋白质互补结合的成分洗去，再利用荧光扫描仪或激光共聚焦扫描技术，测定芯片上各点的荧光强度，通过荧光强度分析蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系，由此达到测定各种蛋白质功能的目的。固定在芯片上的蛋白可以是：抗原、抗体、小肽、受体和配体、蛋白质-DNA和蛋白质-RNA复合物等。 * 2.4 蛋白芯片—优势 蛋白芯片较之传统分析方法主要有以下优点 1、蛋白芯片上可以实现成千上万个蛋白质样品的高通 量平行分析, 一次实验可提供大量数据----高通量2、有高的信噪比----高准确性、高灵敏度3、所需样品量极少----微量化4、在整个基因组和蛋白质组水平将ＤＮＡ序列信息与蛋白质产物直接联系起来5、快速、微型化和自动化。 * 2.4 蛋白芯片的检测 探针标记检测法 无探针标记检测法 表面增强激光解吸离子化技术 (Surface enhanced laser desorption/ionization, SELDI) 表面等离子体共振检测技术（surface plasmon resonance, SPR） 原子力显微镜检测技术 （atomic force microscope, AFM ） 同位素标记检测 荧光标记检测 化学发光检测 酶免疫标记检测 胶体金标记检测 * 2.4 蛋白芯片的应用和问题 疾病诊断和预警 药物开发 蛋白质组学 成本过高, 需一系列昂贵的尖端仪器 芯片的标准化问题 提高芯片的特异性、简化样品制备和标记操作程序、增加信号检测的灵敏度和消除芯片背景对于结果分析的影响等等 * 3 核酸检测 核酸检测（nucleic acid testing，NAT）是直接检测病原体核酸的一系列技术的总称，可在尚未检测到抗原或抗体前，先检测到病毒核酸。 其基本步骤包括核酸提取、扩增和检测。也就是常说的基因检测，是通过血液、其他体液或细胞对DNA进行检测的技术，可以诊断疾病，也可以用于疾病风险的预测。 * 3 核酸检测的特点 显著缩短窗口期:HIV窗口期缩短45%，HCV缩短89%，HBV缩短50%。 提 高 灵 敏 度:理论上扩增体系中单拷贝模板也能被检测出。 特 异 性 好:使用荧光探针技术的PCR检测，几乎没有方法学的假阳性。 直接揭示病原体的存在 对操作者及检测环境的要求较高 检测成本相对较高 * 3 核酸检测的一般流程 核酸样品的制备：