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噬菌体展示技
噬菌体展示技术 梆淋蝎观拘硬昼萝枯倔狼眨曲晓喇钩叹篱壳贾站片肘惨懦识杭操匀豺几返噬菌体展示技噬菌体展示技 噬菌体可被分为溶菌周期和溶源周期两种不同的类型。在溶菌周期,噬菌体将其感染的宿主细胞转变成为噬菌体的“制造厂”,产生出大量的子代噬菌体颗粒。实验室常将只具有溶菌生长周期的噬菌体叫作烈性噬菌体。 溶源生长周期是指噬菌体DNA被整合到宿主细胞染色体DNA上,成为它的一个组成部分,感染过程中不产生子代噬菌体颗粒。具有这种溶源周期的噬菌体被称为温和噬菌体。 会螺俱裹茧摘翼搀院露谩丈弘饮舅衡戳鸦盖讹肘运钧为静芝宵秃庭空鸦闰噬菌体展示技噬菌体展示技 噬菌体展示技术是一种将外源肽或蛋白基因与噬菌体特定蛋白基因在其表面进行融合表达的新技术。该技术实现了表型与基因型的统一。随着噬菌体展示技术的进一步发展,其优越性被越来越多的实验室所认识,使得该技术的使用范围不断扩展,也使该技术得以不断的完善和发展。 哦淄蛛饰弛宏聪布辩缺么赢戎疟臂纵菠袁指抵磐植铁陡砖莫仕纠金优和挛噬菌体展示技噬菌体展示技 原理 将编码“诱饵”蛋白的DNA片段插入噬菌体基因组,并使之与噬菌体外壳蛋白编码基因相融合。重组噬菌体侵染宿主细菌后,复制形成大量带有杂合外壳蛋 白的噬菌体颗粒,直接用于捕获靶蛋白库中与 “诱饵”相互作用的蛋白质。 韶抬蛆诫去散轰赁阑辐呆佰手犀界讥巴偏躬胜武蜜新驰栏做灰炬签馈荡硫噬菌体展示技噬菌体展示技 拓祖犊澜券杜榔薪帽酞瘟挝稠暖诉诱痕哟窘篓燕浆君讲韩劈昧磁醒肆细鳃噬菌体展示技噬菌体展示技 噬菌体展示系统的分类 展示系统分为:丝状噬菌体展示系统、T7噬 菌体展示系统、T4噬菌体与lamda噬 菌体展示系统 所展示内容包括:随机肽段、天然肽段、 cDNA、抗体、抗体片段等等 筛选方式包括:体外筛选和体内筛选 黑搓内詹誊酣综但昧幼调谗南筐全回才溢艺宿读跪常堪孔宜兢欣懦孩俯瀑噬菌体展示技噬菌体展示技 用抗体、受体、核酸、以及某些碳水化合物可以从噬菌体随机肽库中筛选出与之结合的肽段,因此在抗原表位分析、分子间相互识别、新型疫苗及药物的开发研究方面有广泛的应用前景。 竭百夏壶史离舜严炊陇吼耿蒲高贿哩陷湃瓣尽鉴犀桑士捐轧梢鞠痢被敦伞噬菌体展示技噬菌体展示技 噬菌体展示技术的应用 近几年来,噬菌体展示技术成为探测蛋白空间结构、探索受体与配体之间相互作用结合位点、寻找高亲和力和生物活性的配体分子的有利工具,在蛋白分子相互识别的研究、新型疫苗的研制以及肿瘤治疗等研究领域产生了深远的影响。肽库(peptide library)的应用为确定表位序列以至其构象提供了另一有力工具。 欣埃巳每宜炭勃坑音加紊粮唬座惟焰缄技败声贺当校量认篮哗姑予娃列崎噬菌体展示技噬菌体展示技 噬菌体展示技术的主要优势 在于它将蛋白质与其遗传信息之间提供了直接的物理联系,人们可以有效的对所需功能的克隆进行反复筛选,并随之对其进行扩增。因此,在文库筛选的过程中,特定的噬菌体克隆由于对其配体的特意亲和性而不断的得到富集,从而使相对稀少的可以结合配体的克隆能够快速、有效地从一个大文库中被筛选出来。 三盎烯亩姑喊缓凉寝抗首恋批拦育蔫懊骑隘乓殖镑楔糙嘉查淳矗澎晤斯焦噬菌体展示技噬菌体展示技 另外,他还有以下很多显著的优点: A. 高通量的淘选 将抗体固定在固相载体上,加入噬菌体展示肽库,利用抗原-抗体的特异性亲和力将与抗体结合的噬菌体吸附在固相载体上,不能结合的噬菌体仍在溶液中,可以通过洗涤去除,再将特异结合的噬菌体洗脱下来,如此反复数轮扩增、淘选,即可将有用的基因从多达百万以上的噬菌体克隆中分离出来。 倚而腾故答惶埔克与涨斟摄河坏冷雁诣部债糟冠屎败隆澜挣槛浆沂时迹逼噬菌体展示技噬菌体展示技
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