第四章中药制剂的含量测定要点.ppt

电渗流：高压作用下，双电层中的水合阳离子整体地朝负极方向移动，产生电渗流（EOF）。 六、毛细管电泳法 影响电泳流的因素 影响电渗流的因素 电场强度 介质特性 有效电荷 粒子的大小、形状 电场强度 毛细管材料 溶液pH 电解质溶液成分与浓度 添加剂 温度 六、毛细管电泳法 一般情况下，电渗流速度（νep）是电泳流速度（ νeo）速度的5-7倍。 粒子的运动速度 ν= νep+ νeo =(μep + μeo) E E为电场强度 μ 为淌度 六、毛细管电泳法 按分离模式分为： 毛细管区带电泳（CZE） 毛细管凝胶电泳（CGE） 毛细管等速电泳（CITP） 毛细管等电聚焦电泳（CIEF） 胶束电动毛细管色谱（MEKC或MECC） 毛细管电色谱（CEC） 六、毛细管电泳法 七、原子吸收分光光度法 原子吸收分光光度法是由待测元素灯发出的特征谱线通过供试品经原子化产生的原子蒸气时，被蒸气中待测元素的基态原子所吸收，通过测定辐射光强度减弱的程度，求出供试品中待测元素的含量。 测量对象:是呈原子状态的金属元素和部分非金属元素，毒害元素及微量元素。 特点：灵敏度高、选择性和重现性好、干扰少、操作简单快速，测定范围广 工作曲线的线性范围窄、测定不同原色一般需要不同光源灯 定量：A=KC 锐线光源—空心阴极灯 所用仪器为原子吸收分光光度计，它由光源、原子化器、单色器、背景校正系统、自动进样系统和检测系统等组成。 光源：常用待测元素作为阴极的空心阴极灯。 原子化器 主要有四种类型：火焰原子化器、石墨炉原子化器、氢化物发生原子化器及冷蒸气发生原子化器。 七、原子吸收分光光度法 （一）定量分析方法： 标准曲线法 试样基体影响不大，有空白参比 标准加入法 试样基体影响大，没有纯净的基体空白或测定纯物质中极微量的元素时 内标法 （二）样品的处理： 分解试样：酸溶解或碱熔融 有机试样：先进行消化 第三节 含量测定方法选定原则及验证 （一）含量测定方法选定原则： 据测定对象进行选择 据被测成分性质选择 视被测定对象是无机离子还是有机分子而定 视被测定物质分子量大小而定 视被测定物质的含量高低而定 联用技术 （二）含量测定方法验证： 准确度 精密度 专属性 检测限 定量限 线性 范围 耐用性 二、实验条件的选择 1、固定相的选择 1）气—液色谱 ①固定液：按极性相似、化学官能团相似的相似性原则和主要差别选择。 ②载体：一般为适宜粒度，经酸洗并硅烷化处理的硅藻土。 2）气—固色谱：固定相大多采用高分子多孔微球（GDX），用于分离水及含羟基（醇）化合物。 四、气相色谱 2、柱温的选择 选择的基本原则：在使最难分离的组分有符合要求的分离度的前提下，尽可能采用较低柱温，但以保留时间适宜及不拖尾为度。 高沸点的样品（沸点300-400℃），采用1-5%低固定液配比，柱温200-250℃。 沸点为200-300℃的样品，采用5-10%固定液配比，柱温150-180℃。 沸点为100-200℃的样品，采用10-15%固定液配比，柱温选各组分的平均沸点2/3左右。 气体等低沸点样品，采用15-25%高固定液配比，柱温选沸点左右，在室温或50℃下进行分析。 对于宽沸程样品，需采用程序升温方法进行分析。但需注意的是柱温要低于固定液的最高使用温度。 四、气相色谱 3、载气的选择 主要从对峰展宽（柱效）、柱压降和检测器灵敏度的影响三方面考虑。 N2是最常用的载气； 载气流速较低时，宜用N2；流速高时，宜用H2、He； 较长色谱柱，宜用H2作载气； 热导检测器应选用H2、He；氢焰检测器、电子捕获检测器，一般用N2； 一般控制载气流速高于其最佳流速。常用的载气流速为20-80 ml/min。 四、气相色谱 4、其他条件的选择 气化室（进样口）温度：样品的沸点或稍高于沸点，不超过沸点50℃ 检测室温度 100-300 ℃ 进样量 在检测器灵敏度足够的前提下，尽量减少进样量，通常以塔板数下降10%作为最大允许进样量。 5、检测器 热导检测器（TCD），氢焰离子化检测器（FID），氮-磷检测器（NPD），电子捕获检测器（ECD） 四、气相色谱 三、定量分析方法 气相色谱常用的定量方法有内标法、外标法、归一化法等。 1、内标法——为最常用的定量方法 优点：可抵消仪器稳定性差、进样量不够准确等原因所带来的定量分析误差； 缺点：样品的配制较麻烦，有些内标物不易寻找。 关键：选择合适的内标物。 适用范围： ①适用于样品的所有组分不能全部流出色谱柱； ②检测器不能对每个组分都产生信号； ③只需测定样品中某几个组分含量时的情况。 内标物的选择原则： ①应是样品中不存在的纯物质。 ②加入量应接近于被测成分。