刚地弓形虫简.介.pptVIP

机会致病性原虫 虫体侵入宿主细胞后，在宿主机体免疫功能正常的情况下，弓形虫速殖子在细胞内的增殖速度逐渐减慢，最终转化为缓殖子并形成包囊，宿主通常表现为无明显症状的隐性感染。 当宿主免疫功能下降时，缓殖子活化为速殖子，迅速增值并扩散，破坏宿主细胞，引发脑炎、淋巴结炎等多脏器损伤弓形虫病，严重者可导致死亡。 1 滋养体（速殖子） 滋养体为中间宿主有核细胞内分裂繁殖的虫体，又称速殖子。呈香蕉形或新月形，一端钝圆，一端较尖。一侧较平，另一侧较弯曲。虫体大小约（4~7）微米×（2~4）微米。几个到十几个速殖子被宿主细胞膜所包绕形成假包囊。 2 包囊 见于宿主组织中，呈圆形或椭圆形，外有一层由虫体分泌的和富有弹性的紧韧囊壁所包绕，随着囊内虫体缓慢增殖，直径5-100微米不等，内含数百虫体。在包囊内缓慢增殖或相对静止的阶段称缓殖子。 3 裂殖体 裂殖体在终宿主猫科动物的小肠绒毛上皮细胞内发育增殖。虫体为长椭圆形，细胞质色浅，内含4~40个裂殖子，裂殖子呈新月形，在裂殖体内呈扇状排列，前端较尖，后端较钝。 4 配子体 配子体有雌雄之分： 雄配子体呈卵圆形，直径10um，成熟雄配子体内含12-32个雄配子，雄配子近似新月形，两端尖，长约3um。 雌配子体呈圆形，染色后呈深红色，较大的核，位于虫体一侧，雌配子体发育成熟后，虫体略变大，可达15-20um，称为雌配子。 5 卵囊 为雌雄配子结合后形成的合子发育而成。圆形或橢圆形，大小12um ×10um，有两层光滑透明的囊壁，卵囊随宿主粪便排到体外，在适宜温度、湿度下迅速发育并孢子化，24h即可发育成熟，成熟时含有2个孢子囊。 三 基因组成和核苷酸的合成代谢 （一）弓形虫的基因组 1 染色体DNA 除受精的大配子外，弓形虫各期染色体DNA均为单倍体，约含70Mb，9.6×10-16g。染色体组DNA中G+C含量约占55%，为没有甲基化的碱基。 2 线粒体DNA 为环状双链，长度36kb，有一个10kb的反向重复序列。编码虫体代谢过程中与呼吸链相关的物质，还可能编码虫期转化的有关物质。 3 质体DNA 呈环状，大小为35kb，可能编码DNA依赖的RNA聚合酶亚单位β和β’及核糖体RNA小亚单位。 4 弓形虫RNA 主要有3个组分，分别为24S、19S和5S。 （二） 核苷酸合成代谢 1 嘌呤核苷酸合成代谢 弓形虫不能进行嘌呤核苷酸的从头合成，需要宿主细胞提供外源性的嘌呤，虫体才能进行核苷酸的合成。在细胞内寄生的虫体主要依靠次黄嘌呤补救途径获得嘌呤。这可能是弓形虫专性细胞内寄生的原因。 2 嘧啶核苷酸合成代谢 弓形虫能进行嘧啶核苷酸的从头合成，也能通过嘧啶补救途径从宿主细胞的核苷酸池获得。 四 主要基因和蛋白质 （一）主要基因 1、B1 基因 是一个前后重复的35个拷贝的基因，据cDNA序列分析，在456-843bp区域内有一个内含子，此区域有规范的5’和3’剪切位点序列，被广泛用于弓形虫的检测研究中。 2、P22基因（SAG2） 是速殖子基因组中的单一拷贝基因，长度1404bp，内含597bp开放阅读框，为完整的翻译序列，内含多个重复的终止密码子。 3、P30基因（SAG1） 单一拷贝，不含内含子，分子量大约为34700 ，编码蛋白质序列为319氨基酸。 4、ROP1基因 为2.1kb的单一拷贝ROP1的mRNA全长2155nt，核苷酸序列86-143之间可能存在一个内含子。 （二）主要蛋白质功能 1、P30（SAG1） P30蛋白占速殖子全部蛋白质的5%，是弓形虫速殖子侵入宿主细胞与细胞受体结合的重要虫体配体，速殖子与宿主细胞的粘附作用，可以被抗P30单克隆抗体6A8所抑制，单克隆抗体6A8的Fab片段也能抑制虫体的粘附作用，而且具有计量依赖性，P30分子构象的变化，能影响虫体对宿主细胞的粘附作用。 2、P22(SAG2)和P43（SAG3） P22(SAG2)和P43（SAG3）在虫体胞膜位置上与P30靠近，能协助P30使虫体迅速入侵。用抗P22单克隆抗体，速殖子与宿主细胞共同卵育，虫体在宿主细胞外堆积，延缓对宿主细胞的附着。当抗体压力解除后，堆积的虫体侵入细胞的活动力增强。 3、ROP1 ROP1在弓形虫侵入宿主细胞的过程中起到了PEF的作用，当某些蛋白质因子或介质作为PEF能增加侵入的有效性，而单克隆抗体Tg49既能抑制PEF，也能识别ROP1，所以认为ROP1就是PEF。 3、致密颗粒蛋白 是弓形虫分泌排泄抗原的