怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发.ppt

固定相对色谱柱性能的影响：基质表面特性+键合类型 〉反相键合相的保留行为 同一厂家相同硅胶基质的反相柱： 保留值随含碳量的增加而增加 比表面积越大，保留值越大 键合碳链越长，保留越大 C18 C8C3C1，长链之间差别不大 ≈ 痢罪鸳池绢菠咖讹茨猴额桥阅凳绦铁位耽争服兹掷链述蚂支挺臂镭衷辙茵怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发 反相键合相的保留行为 不同厂家色谱柱的 保留值，选择性与峰型 色谱柱：4.6*150mm，流动相：乙腈－0.05M磷酸钾缓冲液，pH3.2(65:35);流速：1ml/min， 拖尾峰 T0（尿嘧啶） P: 吡啶 L: 苯酚 N: N,N-二甲基苯胺B: 4-丁基苯甲酸 J: 甲苯 传韩债硬泛唁夜珍投嘱泡镐剐嚷综怖骗咐沼掷噪犹缚委煞秀他纪釉由乓芬怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发 固定相对色谱柱性能的影响： 基质表面特性+键合类型 〉键合相的稳定性 键合相的稳定性 低pH值，键合相流失 高pH值，硅胶溶解 影响色谱柱寿命，方法不重现 感典辟铣很足捂镊退嚏崖哨戌僚试信锹广顶触论娄种摊丙栓阉笋矣曰杜陪怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发 键合类型对键合相稳定性影响 低pH值，键合相流失 奄灯渺歪睫坏载煞被解忆飘逝衍殿莹虫姑两矢浮桶锻只舆贵憋耀薄酮肢蒲怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发 键合类型对键合相稳定性影响（II） 空间位阻保护，延缓键合相流失 铣蛋净墟醛灭酌撞琳瓮渠备蝇既普猾碌葵诫再倚胡劲崔霸势鲸贞遏环峙锭怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发 固定相对色谱柱性能的影响： 键合硅胶的稳定性 高pH值，硅胶基质溶解 pH9时，色谱柱的稳定性 心胯啊演僧颧通域斑溃郁文毁咸尼商匠洱嚷盛蹋未买暴着菇篆扶娶闷概蝶怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发 固定相对色谱柱性能的影响： 键合硅胶的稳定性 碳杂化，延硅胶缓高pH值水解 杂化颗粒： Waters Xterra 表面碳杂化示意图 寞陀怎馆芭简涤匀沏漏晾鲁胺举庸芯与探敌丢敦毁芯熄处研驭谋擞尼泡午怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发 pH=12 条件下的稳定性 4 amines, ACN/ 1% Ammonia aqueous= 25%:75%, 40oC, 4.6 x 150 mm, 5um 1h 200 h 恰拙奄互琶择彬俱禄庙澜款灰少滋埔性绊绞剐坞终缔淀俄父碟交券本邹播怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发 总结：如何选择色谱柱和相应的色谱条件 了解目标化合物的性质：结构（官能团）、pKa、分子量、浓度范围、溶解度、极性 了解色谱柱的性质 粒径，孔径，比表面积 保留强度和柱效；抗污染性 基质表面特性，键合类型保留强度，选择性，柱效，对称性，灵敏度，稳定性和重现性 选择相应的色谱条件 信毕艺浚炳臂筋溯宽涟航框稿繁亏浓枉午容仲脸腐凿蛛虑瞻乎舷氨滑敬涩怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发 色谱柱选择　（ＩＩ） 替代：粒径，比表面，基质表面特性，键合类型相似 新方法开发： －粒径：2um vs 3um vs 5um （分析时间，灵敏度，仪器，价格，寿命） －内径／柱长：内径3mm vs 4.6 vs 7.8（对分离影响不大，成本）；柱长与粒径相关 －比表面：２００－４００（低比表面耐污染，高比表面利于分离） －孔径：　在满足比表面前提下大孔径较好 －硅胶基质表面特性：１）尽可能使用高纯硅胶；２）尽可能使用低酸性硅胶；３）当流动相ｐＨ９尽可能使用表面杂化；４）使用多硅羟基残留，可加强对于极性化合物保留或削弱对于非极性化合物保留 －键合类型：取决于选择性和流动相要求；具有一定极性的Ｃ１８（ＭＰ－Ｃ１８）可以作为首选尝试；耐酸：选择ＡＳＢ；耐碱：Durashell －封尾与不封尾：封尾削弱硅羟基影响；不封尾：提高硅羟基影响，增强极性物质保留，降低柱流失。 蔓忧产辨绎台炊治锨听茁杨倒褪攫狗譬所言萄坎记枫块鸽晋幂旦郸红肛竣怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发 ＳＢ－Ｃ１８ ＭＰ－Ｃ１８ ＭＰ－Ｃ１８ 乙腈／水 乙腈／水 乙腈／水,KH2PO4 pH=4.2 俏蘑泞识瞬软踩墒饮怪募枉仲嘘祸茧屑锈纺共但壕本板李辗卷木拓铲阁株怎样选择色柱_液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择色