12讲-生物技术课件.pptVIP

生物技术 应用自然科学及工程学的原理，依靠微生物、动物、植物体对物料进行加工，以提供产品为社会服务的技术——1982年，国际合作与发展组织 以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的——1986年，国家科委 现代生物技术 传统生物技术：微生物发酵，一般可分为上游/中游/下游过程 现代生物技术：以DNA重组为主要手段的基因工程为核心，也包括酶工程/细胞工程/发酵工程等；多学科交叉；广泛使用计算机及各种高科技仪器设备；应用领域广泛 分子生物学基础 DNA即脱氧核糖核酸，携带决定生物遗传，细胞分裂、分化、生长以及蛋白质生物合成等生命信息 DNA分子的基本单位是脱氧核糖核苷酸，由碱基、脱氧核糖和磷酸基三部分组成 碱基有四种：A、G、C、T 利用杂交瘤细胞制备单克隆抗体 克隆“多莉羊”——细胞融合技术的高峰 酶催化反应动力学 发酵工业回顾 几千年前，人类开始酿酒、制酱、制奶酪等 1675年，列文虎克发明了显微镜，观察到了微生物 巴斯德证明酒精发酵是由于酵母菌引起的，发酵现象是由微生物所进行的化学反应 柯赫建立了单种微生物的分离和纯培养技术，新的发酵产品不断出现，以固态发酵和浅层液态发酵为主 上世纪40年代，抗生素大规模深层发酵工艺建立 随着新型发酵设备、发酵工艺和育种技术的发展，现代发酵工程达到了一个新的高度 发酵工程的内容 发酵工程由三部分组成：上游工程、发酵工程和下游工程 上游工程包括优良菌种的选育、最适发酵条件（pH、温度、溶氧和营养组成）的确定、营养物的准备等 发酵工程主要指在最适发酵条件下，在发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的工艺技术。要求严格的无菌生长环境。可分为分批发酵，补料分批发酵和连续发酵 下游工程指从发酵液中分离和纯化产品的技术。包括固液分离技术，细胞破壁技术，蛋白质纯化技术，和产品的包装处理技术。还要考虑发酵后的菌体与废物处理问题 菌种选育 发酵工业的生产水平取决于三个要素：生产菌种、发酵工艺和设备 菌种选育的目的是为了改良菌种的特性，使其符合工业生产的需要 提高其生产能力 能适应特定的工艺条件，如能利用廉价的原料、耐受性好 目前主要采用自然选育和诱变育种的方法，工作量大，有一定盲目性 基因工程、细胞工程等育种方法具有定向性 发酵的基本过程 初级代谢产物和次级代谢产物的比较 发酵生物反应器 发酵罐是最重要的微生物细胞反应器 染菌率低 大型化，有利于提高经济效益 过程优化可提高产量和降低成本 利于提高产品回收率和质量 生物反应器的基本类型 搅拌式生物反应器（stirred tank reactor） 鼓泡塔式反应器（bubble column） 气升式反应器（airlift reactor） 几种常见的生物反应器 发酵罐的结构 发酵过程监测 物理参数 温度、压力、流量、转速、粘度、泡沫位等 化学参数 pH、溶氧、尾气、发酵液成分、离子浓度等 生物参数 生物量、ATP、蛋白质等 在线与非在线测量 间接测量 * 本讲摘要 以重组DNA操作为核心技术的过程被称为基因工程。基因工程的发展带动和促进了蛋白质工程、发酵工程和细胞工程的发展，它们相互补充和相互渗透，形成了生物技术的上游与下游的关系。 重组DNA技术的一般操作步骤有：(1)获得目的基因；(2)构建重组质粒；(3)转化受体细胞；(4)筛选和鉴定转化子；(5)培养转化细胞获得所需性状或所需产物。 * 思考题 1、基因工程技术的发展给人类带来的影响？ 2、基因工程的基本过程？ 3、获取目的基因的方法？ 4、DNA片段如何与载体连接? * 将老鼠的基因转到大肠杆菌中 抽取DNA 切下鼠DNA 切开质粒DNA 将质粒导入宿主细胞 混合、连接 * 将老鼠的基因转到大肠杆菌中 培养基中加抗生素 培养 裂解细胞释放DNA 分子杂交 分离扩增目的克隆 * 2.3 基因工程应用 基因工程在医学上被用于大量生产过去难以得到或几乎不可能得到的蛋白质－肽类药物。 10g胰岛素 1000 磅牛胰 200升发酵液 干扰素 1200升人血 1升发酵液 2－3万美元/病人 200－300美元/病人 * 基因工程技术提高奶酪产量 哺乳小牛 胃 凝乳酶 凝乳酶基因 啤酒酵母 转入 制造奶酪 * 转基因农作物 转基因植物获得新的性状 * 2002年全球转基因作物种植情况 * 转基因动物 转基因动物首先在小鼠获得成功。现在转基因动物技术已用于牛、羊，使得从 牛/羊 奶中可以生产蛋白质药物。称为“乳腺反应器”工程。 例如：从转基因羊的羊奶中提取出治疗心脏病的药物tPA 蜘蛛山羊 转基因山羊能通过乳腺分泌产生有着超强抗张强度的蜘蛛丝，很多科学家把蜘蛛丝叫做“生物钢”。 * * 环境工程菌 美国 GE 公司