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11 生物技术与人类未来 11.1 生物技术定义 11.2 生物技术的方法和主要内容 一、基因工程-DNA重组技术与蛋白质工程 二、发酵工程 三、细胞工程 四、动物克隆技术 五、干细胞技术 六、生物芯片技术 11.3 生物技术的应用 11.4 生物技术面临的问题与挑战 11.5 生物技术造福人类 现代生物技术发展大事记 1953年 Watson、Crick发现DNA双螺旋结构 1973年 Cohn和Boyer等完成了DNA体外重组，一举打开基因工程学大门 1975年 Kohler和Milstein创立了单克隆抗体杂交瘤技术 1976年 Swanson与Cohn合作，全球第一家生物技术公司－GeneTech公司问世 1982年 第一个用基因工程技术生产的药物－人工胰岛素上市 1988年 美国K Mullis发明PCR技术 1997年 英国Wilmut等完成首例哺乳动物－绵阳“多莉”的克隆，生物芯片问世 1990年 人类基因组计划启动，2000年 人类基因组工作框架图完成标志功能基因组时代的到来 限制性内切酶-DNA的分子刀 载体： 因为切割的DNA并不能直接进入到细菌等宿主细胞中,需要通过合适载体才可能转入到宿主细胞中,并随宿主细胞繁殖而复制。载体就是运送目的基因片段进入宿主细胞的工具。 通常载体要求具备以下特性： ①具有合适的限制性酶切位点 (克隆位点) ②能够自我复制，并带动插入的外源基因一起复制 ③ 细胞内拷贝数要多 ④具有合适的筛选标记 ⑤通常载体的分子量要小（但有时要求载体分子量要大些） ⑥ 细胞内稳定性高 目前最常用的原核细胞的克隆载体包括细菌质粒、λ噬菌体、cosmid质粒等DNA。 质粒载体的一般结构 基因克隆以后便有了大量目的基因，下一步就是使其在合适的宿主细胞中表达，产生需要的基因表达产物或使宿主生物具备所需要的形状，外源基因还要能在宿主细胞中稳定地遗传。这一过程就是遗传转化。 所谓的宿主细胞，就是接纳外源DNA的细胞。它们可以是细菌、蓝藻等原核生物或其他一些原生生物细胞，也可以是植物或动物等真核生物细胞。 为使目的基因表达，有时还需将目的基因插入表达载体。 宿主菌或受体细胞的种类有： 大肠杆菌/噬菌体 蓝藻/蓝细菌 酵母 昆虫细胞 哺乳动物细胞(如CHO细胞株,受精卵,干细胞甚至活体组织) 植物原生质体细胞（除去细胞壁的）等 五、干细胞技术 什么是干细胞？ 存在于胚胎和成体中具有自我更新和分化能力并可分化产生至少一种或多种终极特化细胞的功能细胞。 干细胞的种类 1、胚胎干细胞（ES细胞）:胚胎发育早期，受精卵分裂发育成囊胚时的内层细胞团，可以自我更新并具有分化为体内所有组织的能力，是全能性细胞 小鼠的胚胎干细胞在70年代就可体外培养；人胚胎干细胞最近才成功； 2、造血干细胞：骨髓、外周血、脐带血、经血，骨髓50年代就临床移植; 3、成体干细胞（ASC）:包括造血干细胞、表皮干细胞、神经干细胞等，研究进展使人们扩大了对ASC分化潜能的认识。但通常它只能分化为特异组织细胞 干细胞的技术方法 几十年来，科学家一直希望制造人出ASC即成体干细胞。2007年日本和美国分别宣布，通过向人皮肤细胞中植入4个经过重新编码的病毒基因，使普通皮肤细胞转化为具有类似胚胎干细胞的功能，这就是诱导式多功能干细胞（又名iPS）,能发育为任何器官或组织，而且iPS不需要人类卵子，也不需要制造或者破坏胚胎，因此避开了伦理和技术障碍。 其他干细胞培养和定向分化诱导，是当前的研究热点。? 干细胞技术的应用和前景 理论上，可以用来治疗各种疾病，可以体外制造人体器官等，前景广阔， FDA已批准一例。但还有许多机理和技术需要探索和解决。 一、生物技术与医药健康- 分子诊断、基因治疗和医药研发二、生物技术与工业-  新型生物材料 生物能源 微生物发酵工程三、生物技术与农业 ﹡遗传病产前检测 RNA干扰（RNAi）技术就是利用一小段双链RNA （dsRNA）导入人体或其他哺乳动物细胞中，使特定的基因表达沉默。 随着RNA干扰的分子生物学机制和功能的进一步阐明，RNA干扰技术体系的逐步建立，使 RNA干扰技术已成功应用于线虫、果蝇、真菌、植物及哺乳动物等生物的基因功能研究，并在研究与治疗遗传性疾病、病毒感染免疫缺陷和肿瘤等重大疾病的基因治疗和药物筛选方面，具有广阔的应用前景。 2001年Nature首家报导：在哺乳动物培养细胞中通