第1章 蛋白质化学课件.pptVIP

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* * * 一级结构决定生物学功能 相似结构表现相似的功能: 抗利尿激素 H2N-半胱-酪-苯丙-谷-天冬-半胱-脯-精-甘… 催产素 H2N-半胱-酪-异亮-谷-天冬-半胱-脯-亮-甘… 不同结构具有不同功能 催产素对子宫平滑肌和乳腺导管的收缩作用抗利尿激素 催产素对血管平滑肌的收缩效应和利尿作用抗利尿激素 (1%) * (三)蛋白质的一级结构与分子病 分子病:由于遗传物质(DNA)的突变、导致其编码蛋白质分子的氨基酸序列异常,而引起其生物学功能改变的遗传性疾病称~ 镰刀状红细胞贫血症 正常Hbβ6 -TGT-GGG-CTT-CTT-TTT- - 苏 - 脯 - 谷 - 谷 - 赖- 异常Hb -TGT-GGG-CAT-CTT-TTT- - 苏 - 脯 - 缬 - 谷 - 赖- * 镰刀状红细胞贫血症 异常的红细胞 正常的红细胞 酸性氨基酸变成非极性氨基酸,降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度,血红蛋白聚集成丝,互相粘着,在氧分压较低时易在红细胞中析出,导致红细胞变形。 * 二、蛋白质的空间结构与功能的关系 高级结构与蛋白质功能的表现有关。 构象破坏,功能丧失;恢复自然构象,功能恢复。 * (一)肌红蛋白与血红蛋白的结构 肌红蛋白三级结构 血红蛋白四级结构 * 肌红蛋白:储存O2,对O2亲和力大 血红蛋白:运输O2 二者的功能为什么不同? * 空间结构体现生物活性:结构改变,功能改变 * 血红蛋白与氧的结合具有协同作用 当第一个氧分子与血红蛋白结合后会促进第二个氧分子与血红蛋白结合,依次类推 * 在氧分压很低的情况下,HB容易释放氧 肌红蛋白(Mb)和血红蛋白(Hb)的氧解离曲线 变构效应(别构效应):O2与血红蛋白结合后引起血红蛋白结构的变化 * 别构效应(变位效应,allosteric effect):蛋白质分子的特定部位与小分子化合物结合后,引起空间构象改变,从而促使生物学活性变化的现象。 * 第五节 蛋白质的理化性质及分离方法 一 蛋白质的两性游离性质 (一)两性游离和等电点 蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外,氨基酸残基侧链中某些基团,在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。 酸性 碱性 * 蛋白质的等电点 当蛋白质溶液处于某一pH时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。 大多数蛋白的等电点接近5.0 * (二)等电点沉降分离蛋白 在等电点时,蛋白成中性,溶解度最小, 容易沉淀 不同蛋白具有不同等电点,利用该特性来分离不同的蛋白质 * (三)电泳分离 蛋白分子在溶液中可带净的负电荷或带净的正电荷,故可在电场中发生移动。不同的蛋白分子所带电荷量不同,且分子大小也不同,故在电场中的泳动速度也不同,由此可彼此分离。 支持物:滤纸,醋酸纤维膜, 聚丙烯酰胺凝胶,琼脂糖 * 二 蛋白质的高分子性质 (一)亲水胶体的稳定因素 水化膜:蛋白质分子表面的水层,使蛋白质分子相互隔开,不易沉淀 电荷:电荷排斥,防止聚集 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - - - - - - - - + + + + + + + + - - - - - - - - 带正电荷的蛋白质(亲水胶体) 带负电荷的蛋白质(亲水胶体) 在等电点的蛋白质(亲水胶体) 酸 酸 碱 碱 脱水 脱水 脱水 不稳定的蛋白质颗粒 (沉淀) 带正电荷的蛋白质(疏水胶体) 带负电荷的蛋白质(疏水胶体) 碱 酸 67 * 三 蛋白质沉淀 沉淀:分散在溶液中的蛋白质分子发生凝聚, 从溶液中沉淀析出的现象。 (一)盐析法:高浓度的中性盐破坏水化膜,中和电荷使蛋白质沉淀的过程,称为~。如硫酸铵,硫酸钠,氯化钠 * 半饱和硫酸铵:沉淀血清中球蛋白 饱和硫酸铵:沉淀血清中清蛋白 盐析:分离蛋白的方法 优点:不破坏蛋白的天然结构 缺点:需要透析去除盐类物质 * (二)重金属盐沉淀蛋白质 Ag+, Hg2+,Cu2+, Pb2+ 蛋白发生变性 对于重金属盐中毒的病人服用酪蛋白和清蛋白 * (三)生物碱试剂和酸沉淀蛋白 生物碱:苦味酸,鞣酸,钨酸 酸:三氯乙酸,硝酸,磺酸水杨酸 用钨酸沉淀蛋白,去除血中蛋白 (四)有机溶剂沉淀蛋白质

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