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实验一细菌的检查法及真菌观察
医学微生物实验 Experiment of Medical Microbiology 细菌的培养法 细菌生长繁殖必要条件 营养物质:水、碳源、氮源、无机盐、生长因子 环境条件:酸碱度、渗透压、温度和必要的气体 培养基的定义 微生物生长繁殖所需要的营养物质混合而成的营养基 质,一般pH为7.2~7.6,高压灭菌后使用。 培养基分类 按其营养组成和用途不同 基础培养基: 营养培养基: 选择培养基: 鉴别培养基: 厌氧培养基: 按物理状态不同 液体培养基: 用于大量繁殖细菌 固体培养基: 液体培养基中加入1.5%~2.5%琼脂粉,用于细菌分离和纯化 半固体培养基: 琼脂粉含量在0.3%~0.5%, 用于观察细菌的动力和短期保存菌种 细菌在培养基中的生长情况 液体培养基:表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 固体培养基:菌落,菌苔 半固体培养基: 细菌培养的应用 在医学中的应用 感染性疾病的病原学诊断 细菌学的研究 生物制品的制备 在工农业生产中的应用 在基因工程中的应用 实验三 细菌的培养 培养基 菌种 方法 液体接种 斜面接种 细菌的形态和结构 革兰染色法 菌种:两个单菌落E、S 试剂:生理盐水、结晶紫、碘液、95%乙醇、沙黄 材料:酒精灯、接种环、玻片、 步骤 ①涂片 ②自然干燥 ③固定 ④染色 初染:结晶紫,1~2滴,时间1分钟,用水冲洗。 媒染:碘液, 1~2滴,时间1分钟,用水冲洗。 脱色:95%乙醇数滴,时间半分钟(30秒),用水冲洗。 复染:沙黄, 1~2滴,1分钟,用水冲洗。 ⑤滤纸吸干,油镜观察。 抗酸染色法 标本:结核病人痰涂片,枯草涂片 试剂:石炭酸复红、3%盐酸酒精、碱性美兰 步骤 ①固定 ②染色 初染:石炭酸复红数滴,时间8~10分钟,用水冲洗。 脱色:3%盐酸酒精数滴,时间0.5~1分钟(30秒),用水冲洗。 复染:碱性美兰, 1~2滴,1分钟,用水冲洗。 ③滤纸吸干,油镜观察。 真菌镜下形态观察 1.霉菌小培养:菌丝,孢子 2.新生隐球菌墨汁涂片:厚荚膜、芽生孢子 3.白假丝酵母菌:厚膜孢子、假菌丝 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Crea
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