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植物组织培养的MS培养基 无机营养成分: 大量元素及部分微量元素 有机营养成分: ① 含N物质:包括维生素和氨基酸 ② 碳源:2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂 ④ 相关激素:生长素,细胞分裂素 PH值:5.0-6.0 1.材料: 植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。一般来说,容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。嫩枝生理状态好,容易诱导脱分化和再分化。 2.MS培养基中的营养物质。 3.植物激素: 4.环境条件: pH、温度、光等环境条件。如菊花组培所需pH为5.8,温度为18~22℃,光照条件为每日用日光灯照射12小时。 * * 专题3 植物组织培养 二、理论基础: 植物细胞的全能性 一、植物组织培养的概念 在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工控制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。 三、植物组织培养的基本过程 必要条件: 细胞离体 一定的营养物质、激素和其他外界条件 外植体消毒 接种 愈伤组织 丛芽、生根(胚状体P38) 移栽 (幼苗长壮后) 试管苗 制备MS固体培养基 (无菌操作) 愈伤组织:外植体培养一段时间后会通过细胞分裂形 成愈伤组织。是一种高度液泡化的无定形状 态的薄壁细胞。 四、影响植物组织培养的因素 花药中的花粉 花药中的花粉 胚状体 愈伤组织 丛芽 丛芽 生根 移栽 产生花粉植株(单倍体植株)的两种途径: 选修一:P 38 结果分析与评价 1、能够通过镜检找到处于适宜的发育期的花粉。用醋酸洋红法或焙花青-铬矾法检测单核靠边期的花粉粒。 选修一:P 39 思考:你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗? 答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。 五.菊花茎的组织培养和月季的花药培养比较 结果 操作流程 选择材料 影响因素 基本过程 理论依据 月季的花药培养 菊花茎的组织培养 细胞的全能性 脱分化、再分化 材料、营养、植物激素、pH、温度、光照等。 菊花组培:每日用日光灯照12 h 月季组培:开始不需光照,试管苗形成后才需光照 体细胞 花药(生殖细胞) 制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 选材→材料消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育 正常植株 单倍体植株 不需要无菌条件,在适宜的环境条件下 无菌操作,在培养过程中无需更换培养基 无菌操作,在培养过程中要更换培养基,调节细胞分裂素和生长素的比例 特殊操作要求 水、矿质元素、 水、无机盐、碳源、氮源 水、矿质元素、蔗糖、维生素、有机物、和植物激素。 培养基成分 将植物所需的各种矿质元素按一定比例配制成营养液栽培植物。 在无菌条件下,在适宜的条件下对微生物培养。 在无菌条件下,将外植体接种在适当的培养基上进行培养,最终发育成完整植株。 含义 无土栽培 微生物培养 植物组织培养 植物组织培养技术、微生物培养技术、无土栽培技术的比较 *
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