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生化分离工程[精选]
第7章 离子交换技术 7.6 离子交换技术典型实例 7.6 离子交换技术典型实例 卡那霉素的分离纯化 提取原则: 采用对卡那霉素亲和力强的树脂,进行富集 提取策略: 卡那霉素理化性质:结构、 pKa值、价态 树脂筛选:强酸型、弱酸型 条件选择:溶液pH值、卡那霉素浓度、操作方式 卡那霉素结构式 图1 卡A: R1=OH R2= NH2 C18H36N4O11 MW=484.499 [α]D=+146° 卡B: R1= NH2 R2=NH2 C18H37N5O10 MW =483.54 [α]D =+130° 卡C: R1= NH2 R2=OH C18H36N4O11 MW =484.499 [α]D =+126° 卡那霉素离解常数( pKa值) 卡那霉素离解曲线 树脂类型 强酸型阳树脂(如732): 弱酸型阳树脂(如DK110 、D186 、HZ-I): 2、溶液的pH值 合适的pH值必须达到下列条件: ?? 使卡那霉素能解离 使732或DK110能离子化 卡那霉素能维持在稳定的范围内 ①卡那解离问题 当PH=7.0时 在PH=5.0时 当PH=9.0时 ②树脂解离问题 -SO3H型 732树脂 pK<1 -COOH型 DK110 pK 4~6 ③卡那稳定性问题 卡那稳定存在的pH=6~8。 732树脂离子交换时溶液pH=5.5~6.0; DK110树脂离子交换时,溶液pH=6.8~7.2。 3、原液浓度 卡那是多元有机生物碱 离子交换理论分析 发酵水平 4、操作方式 国内 沿用732静态吸附, 3%NH4·OH动态洗脱法; 国外 采用DK110动态吸附, 2%NH4·OH动态解吸法 5、动态串联方式 西索米星的离子交换树脂提取 西索米星为弱碱性生物有机碱,分子中含有四个氨基,在水溶液中存在四级离解平衡,在不同pH值的水溶液体系中能以不同的电化学状态存在,随着溶液的pH值由高到低而出现逐级解离。 在解离条件下,选用强酸性阳离子交换树脂,或选用弱酸型阳树脂均可达到吸附西索米星阳离子的目的。 目前多选择732强酸性阳树脂进行离交,溶液 pH值5.5,发酵液原液浓度(约1000-1500 ug/ml)。为什么? 西索米星结构式 西索米星离解常数( pKa值) 西索米星的离解曲线 不同pH条件下西索米星的价态分布 pH≥9.7时 pH7.2~7.4时 pH值6.6~6.8时 pH≤4.6时 扁桃酸的离子交换树脂提取 提取策略: 扁桃酸理化性质:结构、 pKa值、溶解度 树脂筛选:强酸型、弱酸型 条件选择:溶液pH值、扁桃酸浓度、操作方式 扁桃酸结构式 扁桃酸pKa值的测定 扁桃酸在非极性溶剂中的溶解度曲线 扁桃酸在非极性溶剂中的溶解度差值曲线 扁桃酸在极性溶剂中的溶解度曲线 扁桃酸在极性溶剂中的溶解度差值曲线 发酵液中R-扁桃酸的711-OH型离子交换提取 阴离子交换树脂的选择 711阴离子交换树脂对扁桃酸发酵液的动态吸附特性 711阴离子交换树脂对R-扁桃酸的动态解吸工艺的选择 711阴离子交换树脂对R-扁桃酸的动态解吸工艺的选择 711阴离子交换分离工艺的验证实验 大孔吸附树脂HZ801分离发酵液中R-扁桃酸研究 3.1 不同流速时,HZ801对扁桃酸的动态吸附特性 3.1 不同流速时,HZ801对苯乙酮酸的动态吸附特性 3.2 不同乙醇浓度对HZ801树脂上R-扁桃酸的动态解吸曲线 3.3不同流速时,50%乙醇对HZ801树脂上R-扁桃酸和苯乙酮酸的解吸曲线 HZ801吸附树脂分离工艺的验证实验 作业 1.名词解释:离子交换技术、阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂、工作交换量 2.请画出732、724、711、701这四种离交树脂的滴定曲线,并说明其物理意义。?? ? 3. DK110树脂在提取庆大霉素时,工艺上与用732树脂提取有何区别,试述原因。 4.为什么用大孔树脂提取卡那霉素时,需要对发酵液进行适当的稀释后才能上柱吸附? Fig 4 Dynamic desorption curve of R-mandelic acid in different velocity of flow with 4%HCl Cl- MA- OH- Fig.5
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