生化实验设计[精选].ppt

生物化学与分子生物学实验 设计性实验 设计性实验的含义和意义 什么是设计性实验？ 设计性实验是指给定实验目的要求和实验条件，由学生自行设计实验方案并加以实现的实验。 设计性实验的意义：培养 科研意识 创新能力 团队精神 实验设计应遵循的基本原则 实验设计题的“五步思考法” 对照实验的四种方法 （一）开题报告的含义与作用 开题报告含义 当课题方向确定之后，课题负责人在调查研究的基础上撰写的报请上级批准的选题计划。 它说明课题应该进行研究、自己有条件进行研究以及准备如何开展研究等问题，也可以说是对课题的论证和设计。 （一）开题报告的含义与作用 开题报告作用 是提高选题质量和水平的重要环节。 是科研能否得到批准资助和顺利开展的关键。 设计好比一项工程的蓝图，没有优良的工程蓝图，绝不可能建设质量良好的工程。 “制定好一份质量优良的设计方案，科研工作就已完成了一半。” （二）开题报告的内容 题目 立论依据 研究方案 1.题目 立题步骤 给出选题范围 查阅文献 * 整理分析，形成假说 立题 题目要求 与内容统一、明确具体、科学规范、 醒目简洁（一般不超过20字） 2.立论依据 国内外研究概况和发展趋势 研究目的 研究意义 参考文献 （1）国内外研究概况和发展趋势 研究现状及现状分析 针对性 先进性 提出尚未解决的问题 你的研究与现状的联系 （2）研究目的 你研究什么？ 表明你在哪一方面研究 课题的焦点 具体 （3）研究意义 你为什么研究？ 简明扼要 应用基础研究：科学意义和应用前景 （4）参考文献 采用并列出近五年的5---10篇 注意正确的书写格式 序号 作者 题目 期刊 时间 卷 期 页 例：[18] 王妍婷.FAS/FASL与妊娠.山西医科大学学报，2002，33（2）：181-184 序号[18]在文中内容的右上角标出 例：------细胞凋亡可能参与妊娠免疫耐受的形成[18] ------ 3.研究方案 研究方案 课题确定之后，在正式开展研究之前制订的整个课题研究的工作计划，它初步规定了课题研究各方面的具体内容和步骤。 研究方案对整个研究工作的顺利开展起着关键的作用，研究方案水平的高低，是一个课题质量与水平的重要反映。 3.研究方案 研究内容 研究方法 技术路线及实验方案 所需实验材料与仪器 （1）研究内容 “具体做哪些？” 研究的对象、研究的问题 研究哪几个方面？有哪几个层次？检测哪几个指标？等 研究内容 举例 研究内容 采用ELISA法及RT-PCR半定量法检测以下指标： ①比较RSA患者与正常孕妇血清sFas/sFasL蛋白和mRNA的变化； ②检测丈夫淋巴细胞免疫治疗前后RSA患者血清sFas/sFasL蛋白和mRNA的变化； （2）研究方法 通过参考文献，调查实验条件选定适当的设计方案回答“怎样做？” 原则：既具有较高的论证强度，又要切实可行 选择恰当的研究对象 设置合理的对照（对比研究），分组 研究方法 举例 研究方法： 酶联免疫吸附实验（ELISA）间接法、RT-PCR半定量法。 ①分组： 正常育龄妇女组 正常早孕妇女组 RSA妇女组 ②例数：每组约50－80例 ③RSA诊断标准：排除遗传、解剖、内分泌、感染性因素以外的URSA自然流产次数≥2次 ④标本：血清，标本源于皖南医学院优生优育研究所不孕门诊 ⑤统计学处理：χ2检验、t检验 直线相关分析 （3）技术路线及实验方案 具体操作程序 按时间和实验顺序来安排 可用流程图、示意图 技术路线及实验方案 举例 技术路线实验方案： ①采血，分离血清，-20℃保存备用 ②ELISA间接法检测ACA、ATA、EmAb ELISA双抗体夹心法检测sFas/sFasL获得OD值 RT-PCR半定量法检测sFas/sFasL mRNA水平 ③数据处理，全部数据输入计算机，用相关统计软件分析数据，寻找差异性、相关性。 （4）所需实验材料与