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柑橘果皮中总黄酮提取工艺研究 指导老师： 目录 一 立题背景和意义 二 试验材料与方法 三 结果和讨论 四 结论 五 自我评价 六 致谢 一、立题背景及意义 二、试验材料与方法 二、试验材料与方法 二、试验材料与方法 准确称取柑橘果皮样品1.000g置于150mL平底烧瓶中，按一定液固比加入溶剂。设定超声波的参数，提取后取出冷却，静置，过滤，滤液定容至50mL作为待测液。取待测液2mL，置于10mL容量瓶中，用溶剂补充至3mL，加入5%NaNO2溶液0.5mL，摇匀，放置6min；加入10%Al(NO3)3溶液0.5mL，摇匀，放置6min；再加入1mol·L-1NaOH溶液4mL，最后加蒸馏水定容至10mL，摇匀，放置15min，于510nm处测定吸光度A。 三、结果与讨论 三、结果和讨论 三、结果和讨论 三、结果和讨论 三、结果和讨论 三、结果和讨论 三、结果与讨论 三、结果和讨论 三、结果和讨论 四、结论 五、自我评价 * * 学院： 专业 ： 2013年05月 答辩人： 立题背景 研究目的意义 目前黄酮类化合物提取方法有溶剂萃取法（碱液提取法和有机溶剂提取法）微波萃取法、超声波法、酶解法、超临界萃取法等方法。本实验利用超声波辅助提取柑橘果皮中总黄酮，考察单因素试验的影响，确定最佳的提取工艺。 柑橘黄酮类化合物在食品，医药，保健品、化妆品方面具有广阔的应用前景。而我国柑橘的栽培面积居世界第一，产量居世界第三。目前在柑橘鲜食和加工过程中，柑橘皮是主要的副产物，每年生产上约有150万吨的果皮资源。这些柑橘果皮几乎99%都被丢弃或填埋，浪费了资源，对环境造成巨大的危害。 试验所需主要试剂和仪器设备 原料和主要试剂 主要的仪器设备 可见光分光光度计，电子天平，组织捣碎机，超声波仪，台式离心机。 柑橘、芦丁市售 ，无水醇、 亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠颗粒以上试剂均为分析纯。 总技术路线 芦丁标准曲线 图3.1芦丁标准曲线 提取功率对提取率的影响 图3.2提取功率对提取率的影响 由图3.2可知：随超声波功率不断增加，黄酮类化合物得率也增大，当超声波功率达60W时，黄酮类化合物的得率达最大，之后随着超声波的功率的增大，黄酮类化合物的得率反而降低。 不同乙醇浓度对提取效果的影响 图3.3乙醇浓度对提取率的影响 由图3.3可知：随着乙醇浓度不断增加，黄酮类化合物的得率也随之增大，当乙醇浓度达到60%时，黄酮类化合物的得率达到最大，之后随着乙醇浓度的增加黄酮类化合物的得率反而降低。 料液比对提取率的影响 图3.4料液比对提取率的影响 由图3.4可知：随着料液比比率增加，黄酮类化合物得率增多，而当料液比达到1:35以后，黄酮类化合物得率最高，再增大料液比黄酮类化合物的得率增加比较缓慢。 提取时间对提取率的影响 图3.5提取时间对提取率的影响 由图3.5可知：随提取时间的增长，黄酮类化合物得率不断增加，提取时间为20min时，黄酮类化合物的得率最高。之后随着提取时间的延长，黄酮类化合物得率则降低。 水平 A超声波功率W B乙醇体积分数（%） C料液比 D超声提取时间（min） 1 55 50 1:25 20 2 60 60 1:30 25 3 65 70 1:35 30 正交试验因素表 确定最佳工艺条件组合 表3.1正交试验因素表 试验编号 超声波功率W 乙醇体积分数（%) 料液比 超声波提取时间min 提取率mg·g-1 A B C D 1 1 1 1 1 33.4 2 1 2 2 2 38.5 3 1 3 3 3 35.2 4 2 1 2 3 46.3 5 2 2 3 1 49.2 6 2 3 1 2 44.5 7 3 1 3 2 38.6 8 3 2 1 3 40.3 9 3 3 2 1 34.8 k1 35.7 39.4 39.4 39.1 k2 46.7 46 39.8 40.4 k3 37.9 38.2 41 40.9 极差 9 7.8 1.6 1.8 最优组合 A2B2C3D1 表3.2 正交试验结果 数据分析 从表3.2的直观分析结果表明，最佳工艺条件为A2B2C3D1，即超声波功率为60W、乙醇浓度60%、料液比为1:35、超声波作用时间20min，用极差分析方法分析可知，A的极差最大其后依次为B、D、C。极差越大，说明该因素水平变动时总指标的变化越大，即该因素对综合指标的影响越大。因此得出对黄酮类化合物提取率的影响强弱顺序依次为ABDC,即超声波功率乙醇体积分数超声波提取时间料液比,其中超声波功率和乙醇体积分数的影响比较大。 验证试验 为了考察上述优选最佳工艺条件的稳定性，在最佳工艺条件下