(足叶乙苷脂质体包封率测定方法研究.docVIP

足叶乙苷脂质体包封率测定方法研究 时军1，陈伟鸿2，程怡2，林德晖2 (1.广州市大学城外环东路280号，广东药学院中药学院，510006；2.广州市大学城外环东路232号，广州中医药大学中药学院，510006) 摘要 目的 建立足叶乙苷脂质体的包封率测定方法。 方法 采用乙醇注入法制备足叶乙苷脂质体，以葡聚糖凝胶-高效液相色谱法测定含量和包封率。 结果 洗脱曲线表明采用蒸馏水（洗脱速度0.5ml/min）作为洗脱溶剂，柱回收率为99.22％，同一批样品包封率结果RSD在2％以内。 结论 葡聚糖凝胶-高效液相色谱法操作简单、准确、重复性好，可用于足叶乙苷脂质体的包封率测定。 关键词 足叶乙苷 脂质体 包封率 Entrapment Efficiency Determination of Etoposide Liposome Shi Jun1 Chen Weihong2 Cheng Yi2 Lin Dehui2 (1.Guangdong Pharmaceutical University , 2.Guangzhou University of Chinese Medicine) Abstract Objective To establish encapsulation efficiency determination method of etoposide liposome. Methods To prepare etoposide liposome by using ethanol injection method, use gel filtration to determine the content and entrapment efficiency of etoposide liposome combining high-performance liquid chromatography. Results The elution curve shows that the use of distilled water (flow rate 0.5ml/min) as the eluting solvent, column recovery ratio is 99.22%, encapsulation efficiency RSD of the same sample is within 2%. Conclusion Gel filtration combining high-performance liquid chromatography method is simple, accurate, reproducible, and it can be used to determine entrapment efficiency of etoposide liposomes . Key Words Etoposide Liposome Entrapment efficiency 足叶乙苷是临床治疗小细胞肺癌、宫颈癌、白血病的一线药物，毒副作用大、药物分布广泛足叶乙苷足叶乙苷足叶乙苷对照品（批号100388-200401，中国药品与生物制品检定所）ePC S（德国Lipoid公司），胆固醇（中国医药公司北京采购供应站），聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG2000-DSPE，德国Lipoid公司），足叶乙苷(北京双鹤药业，批号2007081105)，葡聚糖凝胶G-50（瑞典Amersham公司），甲醇、乙腈为色谱纯，其他药品、试剂均为国产分析纯。Dionex型高效液相色谱系统（P680型泵，PDA-100型检测器，ASI-100自动进样器），Synergi C18色谱柱（250μm×4.6cm，广州菲罗门），90-1型恒温磁力搅拌器（上海沪西分析仪器厂）足叶乙苷采用乙醇注入法制备足叶乙苷脂质体。将卵磷脂、胆固醇、聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂乙醇胺以摩尔比10:5:0.3精密称定，溶于足叶乙苷热乙醇液中，保温(55±2)℃，边搅拌边匀速注入乙醇液至10mL pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS,0.05mol/L)中，注入过程中通入N2除去乙醇。注入完毕后，探头式超声3min，依次过0.8和0.45μm的微孔滤膜，即得足叶乙苷脂质体。色谱柱：Phenomenex Synergi C18柱4.6mm×25cm,5μm)，流动相：甲醇-0.2%NaAc-HAc缓冲液(pH4.0,3:2,V/V)，流速：1.0ml/min，检测波长：285nm，进样量：20μl标准曲线精密称取足叶乙苷对照品适量，用流动相溶解定容，制备成浓度为0.21mg·mL-1的足叶乙苷贮备液，精密量取上述贮备液，