(迭鞘石斛中总多糖的含量测定.docVIP

迭鞘石斛中总多糖的含量测定 李旻 刘友平 张玲 李惠勇 范婧娴 （成都中医药大学 四川成都 610075） 摘要：目的 测定迭鞘石斛中多糖的含量。方法 采用改良后的苯酚-硫酸比色法对迭鞘石斛中总多糖含量进行测定。结果 石斛多糖经苯酚-硫酸法显色后在波长490nm处有最大吸收。本法准确，精密度高，葡萄糖浓度在1.47～14.7μgml-1（r=0.9995）范围内，线性关系良好，平均回收率为98.6%，RSD为1.15%。结论 该法可作为迭鞘石斛质量控制的一种方法。 关键词：迭鞘石斛；苯酚-硫酸法；多糖 Determination of Polysaccharide in Dendrobium denneanum Kerr. LI Min, LIU You-ping, ZHANG Ling,LI Hui-yong, FANG Jing-xian (Chengdu University of TCM, chengdu 610075, China) Abstract: Object: To determine the contents of Polysaccharide in D. denneanum Kerr. Methods: Contents of Polysaccharide is determined by Phenylhydrate-sulfuric acid method. Results: The maximum absorption wavelength was 490nm.Linear range was 1.47~14.7μg·ml-1（r=0.9995Conclusion:The method used in this paper simple.It can be used for determination of Polysaccharide in D. denneanum Kerr. Key words: D. denneanum Kerr.，Phenylhydrate-Sulfuric acid Method，Polysaccharide 石斛为常用名贵中药，具有益胃生津、滋阴清热之功效，用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热、目暗不明等多种病症[1]。现代药理学研究表明，石斛具有抗肿瘤、增强人体免疫力、降血糖、抗氧化、抗衰老和抗血栓等作用。迭鞘石斛（Dendrobium denneanum Kerr.）为兰科石斛属植物，是中药石斛的来源之一，主要分布于我国四川、云南、广西等地，资源丰富，且易于人工栽培，目前在四川的乐山、雅安、洪雅等地已广泛栽培，并已作为商品药材广泛流通于市场。 研究表现，迭鞘石斛中多糖类成分是其具有免疫增强和抗肿瘤作用的活性成分，为完善药材质量评价方法及提高药材的质量标准，本文采用苯酚-硫酸比色法[2]，对迭鞘石斛中的石斛总多糖进行定量分析测定，为迭鞘石斛药材的质量评价提供依据。 1. 材料、仪器与试药 1.1 材料 迭鞘石斛药材于2007年5月自购于四川省夹江县华头镇，经成都中医药大学中药鉴定教研室陈新副教授鉴定其为兰科植物迭鞘石斛Dendrobium denneanum Kerr.的干燥茎。 1.2 仪器与试药 UV-1100紫外-可见分光光度计（上海天美科学仪器有限公司）；BP121S电子分析天平（德国公司）BP211D电子分析天平（德国公司）2. 方法与结果 2.1 溶液的制备 2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取 105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品10.30mg，置 100ml容量瓶中加适量蒸馏水溶解，稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml含葡萄糖0.1030mg）。 2.1.2 供试品溶液的制备 取迭鞘石斛粗粉2.5g，精密称定，置瓶中，2.1.3 苯酚显色液的制备 将50ml浓硫酸缓缓加入10ml水中冷却至室温，加入0.6g苯酚晶体搅拌使其溶解，即得。 2.2 迭鞘石斛多糖的精制 取迭鞘石斛粗粉50g，加入石油醚（60～90℃）250ml，回流提取1小时脱脂，过滤，挥干溶剂，以80%乙醇回流提取1小时，趁热过滤，挥干溶剂，加入蒸馏水500ml回流提取2次，每次1小时，减压浓缩至150ml，用0.1%的活性炭脱色，过滤，加入95%乙醇使溶液含醇80%，静置过夜，沉淀物依次用无水乙醇、丙酮洗涤，60℃减压干燥，制得灰白色粉末状迭鞘石斛多糖。 2.3 最大吸收波长的选择 分别精密称吸取供试品溶液0.5ml、对照品溶液1.0ml分别置具塞试管中，加水至2ml，再加显色液5.0ml，摇匀，放置5分钟，置沸水浴中加热30分钟后，取出，迅速冷却到室温。另取2.0ml水作同上平行操作，作为空白对照，在400～600nm之间扫描。结果表明，对照品溶液和供试品溶液在490nm处有最大吸收峰