病理学技复习题.doc

1.何谓超薄切片？ 由于电镜电子束穿透能力的限制，必须把标本切成厚度小于0.1um以下的薄片才适用，这种薄片称为超薄切片。常用的超薄切片厚度是50至70nm。 2.透射电镜标本取材的基本要求有哪些？ 为了使细胞结构尽可能保持生前状态，必须做到快、小、准、冷：(1)．动作迅速，组织从活体取下后应在最短时间内 (争取在1分钟内) 投2.5%戊二醛固定液。(2)．所取组织的体积要小，一般不超过1mm×1mm×1mm。也可将组织修成1mm×1mm×2mm大小长条形。因为固定剂的渗透能力较弱，组织块如果太大，块的内部将不能得到良好的固定。(3)．机械损伤要小，解剖器械应锋利，操作宜轻，避免牵拉、挫伤与挤压。(4)．操作最好在低温(0℃～4℃)下进行，以降低酶的活性，防止细胞自溶。(5)．取材部位要准确。 3.电镜标本的固定与普通光镜标本的固定有何不同？ 一）.常用固定剂有1、四氧化锇:有强烈的电子染色作用，用它固定的样品图象反差较好。2．戊二醛:优点是对糖原、糖蛋白、微管、内质网和细胞基质等有较好的固定作用，对组织和细胞的穿透力比四氧化锇强，还能保存某些酶的活力，长时间的固定(几周甚至1～2个月)不会使组织变脆。缺点是不能保存脂肪，没有电子染色作用，对细胞膜的显示较差。二）.组织块固定常规采用戊二醛—锇酸双重固定法。分预固定和后固定，中间用磷酸缓冲液漂洗。固定完毕，用缓冲液漂洗20分钟后进行脱水。 电镜 光镜 固定剂， 四氧化锇、戊二醛。 10%福尔马林或4%甲醛 固定方法 戊二醛-锇酸双重固定法。 蒸汽固定、灌注固定。 目的 除了一般光学标本固定目的外，还有电子染色作用。 将组织结构尽量接近与它生前的状态。 标本 1mm×1mm×mm 厚度3-4mm左右 4.电镜标本包埋操作中应注意的事项有哪些？ 包埋操作中应注意以下几点：(1)所有试剂要防潮，最好存放在干燥器中；(2)所用器皿应烘干；(3)配包埋剂时，每加入一种试剂要搅拌均匀；(4)包埋 时动作要轻巧，防止产生气泡；(5)皮肤尽量不要接触包埋剂，以免引起皮炎；(6)盛放过包埋剂的容器要及时用丙酮清洗干净。 5.超薄切片观察前进行半薄切片光学显微镜观察的目的是什么？ 半薄切片进行光学显微镜观察的目的：(1) 定位：通过光学显微镜观察，确定所要观察的范围，然后保留要用电镜观察的部分，修去其余部分。(2)便于对同一组织的同一部位进行光学显微镜和电镜的对比观察。 6.电镜标本为什么要染色，染色方法及常用的染色剂分别是什么？ 未经染色的超薄切片，反差很弱。因此，要进行染色处理，以增强样品的反差。一般是用重金属盐与组织细胞中某些成分结合或被组织吸附来达到染色的目的。重金属的原子对电子束形成散射，从而提高图象的反差。 常用的染色剂有醋酸铀和柠檬酸铅。染色方法有两种：1．组织块染色： 2．切片染色 7.电子显微镜在病理学中主要用于哪些方面？ 病理学中的应用 1.肾脏疾病(肾小球肾炎)及肌病中应用：轻微病变性肾小球肾炎、弥漫性膜性肾小球肾炎、膜性增生性肾小球肾炎 2 肿瘤中的应用：电镜检查能够发挥最大诊断潜能的、电镜检查能提供多半诊断性信息的 8.在哪些情况下电镜检查在病理诊断中能够发挥最大诊断潜能 电镜检查能够发挥最大诊断潜能的：1）.通过发现所谓的神经分泌型致密核心颗粒，证明肿瘤的（神经）内分泌性质。2.）评估具有颗粒状胞浆（嗜酸性细胞，颗粒细胞，内分泌细胞）的肿瘤细胞的性质。3）.确定不同类型肿瘤中的上皮分化（包括腺体和鳞状分化）。4）.通过检测黑色素小体证明肿瘤的黑色素细胞性质。5.通过检测Birbeck颗粒，证明病变属于朗格罕细胞组织细胞增生症范畴。6.通过发现大量的滑面内质网和具有管泡状嵴的线粒体，证明肿瘤由来自肾上腺皮质和性腺的产生类固醇的细胞组成。7.通过检测Weibel－Palade小体，证明肿瘤的血管内皮细胞性质。8.通过检测各个系统的细胞浆微丝，确认骨骼肌和平滑肌细胞。9.通过检测中轴突和其他特征，确认神经鞘细胞。10.通过检测特征性的有界膜的晶体，证明腺泡状软组织肉瘤。11.确认GIST家族肿瘤中平滑肌，神经或其他类型的分化。 9.电镜检查的局限性有哪些？ 1.无论在哪一点取样，用于研究的只是肿瘤的一小部分。 2.缺少真正的特异性超微结构特征，因为专属于一种细胞或组织类型的细胞器或其他结构的数量很少。 3.可能将混杂在肿瘤中的非肿瘤性成分误认为肿瘤。应当承认，任何技术均有这种可能性，但在电镜检查时尤为突出，因为在一块小的组织样本中评估空间关系是困难的。 4.无法鉴定同一细胞类型的反应性病变、良性肿瘤和恶性肿瘤之间。 5.电镜检查费用昂贵。 应用电镜检查最好的时机是，病理医师已在光镜水平将肿瘤的鉴别诊断确定在2或3种肿瘤之间，只有当超微结构特征与光镜特征紧