b第七章动物基因工程上.ppt

注射完成后，用显微外科手术将25—40个受精卵移植到假孕雌鼠的子宫内，制造雌鼠假孕（可以让它与切除了输精管的不育雄鼠交配），将受精卵移入代孕母鼠子宫中大约3周后，接受过注射的受精卵发育生长为幼鼠，由代孕母鼠产下。 二、显微注射法（2） 假孕母鼠 二、显微注射法（2） 转基因动物进行检测： （1）取一小截幼鼠的尾巴，提取DNA进行Southern杂交或PCR检测，看是否存在转入基因。 （2）将它与另一只鼠进行交配来确定转入基因是否存在其生殖系中。 （3）通过对子代进行杂交产生纯合的转基因鼠。 二、显微注射法（3） 通常发育成转基因动物的受精卵一般占注射受精卵的5％。大多数情况下通过微注射法获得转基因动物的成功率只有l/1000。 对于显微注射用的DNA的要求高： 1）转入的外源基因要能够高效表达； 2）可以诱导表达； 3）具有帮助提高整合效率的序列。在注射的载体中加上MAR序列(matrix attach region)，这种序列位于染色体的基部，具有隔离作用，可以帮助基因高效表达； 4）在外源基因两端可加入微卫星序列，因在染色体上也有微卫星序列，两个微卫星序列可以帮助发生同源重组，提高整合效率。 二、显微注射法（4） 用显微注射法获得的几种转基因动物的成活率 转入基因的结构示意图 由于微注射法所注射的DNA在宿主基