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骨肉瘤中血管内皮生长因子受体KDR的表达及其分析 作者：廖博，马保安，刘吉吉，范清宇 【关键词】 骨肉瘤 　　Expression of vascular endothelial growth factor receptor KDR in osteosarcoma and its relationship with microvessel density 　　【Abstract】 AIM: To explore the expression of vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR) KDR and its relation with microvessel density(MVD). METHODS: CD34 and KDR were investigated in the specimens from 102 osteosarcoma patients. MVD was determined with double blind counting. RESULTS: KDR was strongly expressed in osteosarcoma cells, and weakly expressed in vascular endothelial cells. MVD was significantly different between KDR negative and positive groups (Plt;0.05). CONCLUSION: High expression of KDR may be related to oeteosarcoma. 　　【Keywords】 osteosarcoma; endothelial growth factors; receptors, growth factor; endothelium, vascular; microvessel density 　　【摘要】 目的： 研究骨肉瘤中血管内皮生长因子受体（VEGFR 2）KDR的表达情况，及其与微血管密度（MVD）关系. 方法： 对102例骨肉瘤患者的病理标本应用CD34，KDR对其组织切片分别进行免疫组化染色，双盲计数法进行热点内血管测定MVD. 结果： 骨肉瘤KDR在血管周围的肿瘤细胞质呈较强阳性表达，在部分血管内皮细胞质内表达呈弱阳性，MVD在KDR表达阳性与阴性组中的计数经检验有显著性差异（Plt;0.05）. 结论： KDR在骨肉瘤细胞的高度表达可能参与骨肉瘤的发病机制. 　　【关键词】 骨肉瘤；内皮生长因子；受体，生长因子，内皮，血管；微血管密度 　　0引言 　　实体肿瘤的生长和转移依赖于肿瘤间质中血管的新生，许多血管生成因子在肿瘤中均有表达,介导血管新生. 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是其中效力最强的因子之一，它可直接或间接地参与血管新生的每一个过程，可诱导内皮细胞短暂的钙浓度升高、形态改变、细胞分裂及细胞运动，影响内皮细胞的基因表达，降解基底膜，促进血管生成，增加血管的通透性［1］. 目前已证明，KDR是VEGFⅡ型受体，亲和力较高，具有受体型酪氨酸激酶活性，主要表达在内皮细胞. VEGF是通过作用于细胞上的特异性受体而发挥其生物学活性的. 在脑胶质瘤、脑膜瘤和乳腺癌等多种肿瘤组织中KDR的表达上调［2］. 一般认为，KDR可特异性地表达于肿瘤的血管内皮细胞. 因此，我们拟研究KDR在骨肉瘤中的表达情况. 　　1材料和方法 　　1.1材料① 标本：199206/200204,本科保存的骨肉瘤的蜡块标本. 标本均经40 g#12539;L-1甲醛溶液固定,常规石蜡包埋，连续切片(厚4 μｍ). 病例共102（男67，女35）例，患者年龄8～42（平均17.8）岁，术前均未接受过化疗或放疗. 肿瘤直径4～25 cm，≥10 cm 57例，lt;10 cm 45例. ② 试剂：兔抗人KDR蛋白多克隆抗体为美国Santa Craz Biotechnology Inc产品，兔抗人CD34多克隆抗体、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司. 　　1.2方法 　　1.2.1免疫组化实验测量切片常规脱蜡至水，30 mL#12539;L-1 H2O2 10 min灭活内源性过氧化物酶，微波修复，正常山羊血清封闭，抗体工作浓度为1∶100，滴加KDR多克隆抗体4℃过夜，依次滴加生物素化羊抗兔IgG, SABC. DAB显色，苏木素复染，脱水、透明、封片.