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- 2017-01-29 发布于北京
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(一)生物化学方面的要求 酶组织化学的基础是组织化学,而化学反应又是组织化学的基础。所以化学反应的各种条件和影响化学反应的各种因素都要考虑到。 酶是一种催化剂,但其并不参与化学反应本身,只是起到加强酶组织化学反应,显示出酶活性的高低的作用。影响酶活性的因素有多种,如底物的浓度、反应产物的强弱、温度、pH值和试剂质量等。同一种酶,在不同条件下,所显示酶的活性可以相差悬殊。因此,在进行酶组织化学研究时,应极其重视化学反应的良好程度,严格控制实验条件,这样才能对获得的结果作出科学的判断和分析。 (二)形态学方面的要求 1、尽可能保持组织细胞生活时的形态和结构。 2、尽可能保持组织细胞生活时的化学成分和酶的活性。 3、染色法是已知的化学反应,各种条件均可控制。 4、反应产物是一种有色的沉着物, 颗粒要细,并能保留在原位。其颜 色深度与物质含量或酶活性具有一 定量效关系。 5、显示的可视物质必须具有稳定性, 以利于反复观察。 6、反应产物要具有特异性。 肿瘤细胞SDH:四唑盐法 (三)酶组织化学的局限性 1、定位方面的局限性: 酶组织化学要求是使某一物质在原位上显示出来。但由于吸附、弥散和溶解等现象,其定位的改变或假定位是多见的,给分析结果带来很大困难。在进行酶组化染色反应时,用恒冷箱切片法、控制孵育条件、温度、pH值和时间可防止反应产物扩散。 酶组化 大致定位 核仁、胞质、
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