气相色谱简单应用SOP..docVIP

气相色谱的应用与实际操作 气相色谱法简介 气相色谱是一种利用物质的沸点、极性及吸附过程的差异来实现混合物分离的一种技术，其过程如图1-1所示。 图1-1 GC分析流程图 气相色谱的简单应用 1、定性鉴定 对于简单样品，可以通过对照标准物质来定性。即在相同的色谱条件下，分别注射标准样品和实际样品，根据保留值即可确定色谱图上的峰是何种物质。 2、定量分析 常用的色谱定量方法有峰面积百分比法、归一化法、内标法、外标法和标准加入法。此处以6种含磷有机物为例，采用外标法进行定量分析。 实验准备 实验试剂 试剂名称 试剂信息 丙酮 色谱纯 正己烷 色谱纯 1 : 1丙酮：正己烷 V : V 对氧P 100 ppm 对SP 100 ppm O,P’-DDT 100 ppm P,P’-DDT 100 ppm 马拉硫磷 100 ppm 水胺硫磷 100 ppm 2.实验器材 器材名称 规格或型号 一次性吸管 1 mL 定量小管 1 mL GC进样瓶 2 mL，棕色 进样针 5μL 均质器 ika T18，USA 移液枪 10μL 气相色谱仪 Agilent 6890，美国 四、 实验操作 1、混标的配制 分别移取浓度为100ppm的对氧P、对SP、马拉硫磷、水胺硫磷、P,P’-DDT和O,P’-DDT六种含磷有机物的标准品各10μL于同一定量管中，用1:1丙酮：正己烷（V : V）定容至1mL，转移至进样瓶内。 2、单标的配制 分别移取浓度100ppm的对氧P、对SP、马拉硫磷、水胺硫磷、P,P’-DDT和O,P’-DDT六种含磷有机物的标准品各10μL于不同定量管中，用1:1丙酮：正己烷（V : V）各自定容至1mL，转移至进样瓶内。 3、气相色谱的使用 （1）仪器操作流程 仪器打开顺序：氮气总阀 → 气相色谱仪开关 → 计算机开关 → 打开软件 → 烘烤分离柱排出杂质 → 设置各项参数及升温程序 → 进样 → 气相色谱图 → 数据分析 长时间未使用时，需设置烘烤程序，待色谱柱中的水分及其他杂质被排除完毕后，基线降低至1000以下时，方可进样。 （2）软件操作流程 ①在线实验操作 1.进入主界面 2.打开参数编辑器，设定炉升温程序，烘烤分离柱，将残留水分与杂质排出。 3.待柱子烘烤完毕后，检测器与进样器进行升温，选择不分流模式，同时以氮气作为载气，并填写进样器的温度，压力和流速。 4.选择进样的模式为恒流，进样器和检测器的类型分别选择前进样器和前检测器。此处界面可查看分离柱的相关信息（柱长，内径和涂层厚度），同时可设置载气的压力和流速。 5.设计分离的升温程序并保存方法，右界面可查看最高炉温。 6.待基线将至1000以下后，调取已保存的升温程序。在Sample Info填写样品名称，选择保存地址，保存样品信息后，开始进样。 ②离线数据分析 （3）进样及数据分析 Pre Run → 进样针吸取2μL的样品快速注入进样器 → STAR → 出峰 → 数据分析 ◆ 进样时，进样针须先用色谱纯的正己烷清洗三遍，再用标准品或样品润洗三遍，排出进样针中的气泡后（抽吸一定量的溶液，迅速按压排出），吸取2μL标准品或样品进行进样。进样后，进样针须再用色谱纯的丙酮再清洗三遍。 （4）数据分析 1）定性分析 先后将配制好的混标，和各个单标分别进样。混标的色谱图中除溶剂峰外，响应较大的峰数目理论上应与单标的数目相同，若有出入，可能为混合标准品配制失误或升温程序不够合理，导致目标物未能较好地分离。在确保混标配制无误的情况下，出峰数少于混合标准物种的目标物数目时，则应适当调整升温程序，降低升温速度，使各物质气化时间间隔拉长，从而增大出峰时间间隔。 混标中各峰的出峰时间若与单标如物质A1的出峰时间一致，即可判定在此处出峰的物质为A1，由此可一一对混标所出的各峰进行定性分析，同时也可排除混合标准物中所存在的杂质峰。 操作步骤 1.打开离线软件，调取混标数据和各个单标数据。 2.用删除文字按钮删除各个样品的文字信息，将单标的出峰位置与混标进行比对，对混标所出的峰所对应的物质进行定性。如图所示，在10.62处的峰所对应的物质为对SP，而在9.94处出峰的物质为对OP。一一调出单标所出的峰和混标的各峰进行对照，即可知哪些峰为目标物，哪些峰为杂质峰。 经分析，6种含磷有机物及其保留时间如下： 样品名 D-OP MLLL D-SP SALL O,P’-DDT P,P’-DDT tR/min 9.936 10.524 10.