高考生物大一轮复习直击高考训练：选修3第2讲细胞工程Word版含解析.docVIP

选修3　一、选择题 1．(2014年浙江)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是(　　) A．连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型 B．某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞 C．由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆 D．未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状 【答案】B 【解析】连续细胞系的细胞一般都培养了多次，二倍体核型发生了改变，大多数细胞具有异倍体核型；细胞癌变是由基因突变引起的，如果癌细胞在一定条件下(如用秋水仙胺等药物治疗)，则有可能恢复成正常细胞；细胞克隆的最基本的要求是：必须确定所建立的克隆来源于单个细胞。未经克隆化培养的细胞系具有异质性。 2．(2013年重庆)如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是(　　) A．是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞 B．中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成 C．同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 D．是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 【答案】D 【解析】本题主要考查单克隆抗体制备的相关知识。是从已免疫的小鼠脾脏中获得的浆细胞；中使用聚乙二醇或灭活的病毒等，有利于杂交瘤细胞的形成；同时具有浆细胞和骨髓瘤细胞的特性；是经筛选培养获得的能分泌所需特异性抗体的细胞群，故D项正确。 二、非选择题 3．(2015年福建)GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示)，并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答： (1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是________________。 (2)构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的____________限制酶进行酶切。 (3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式，选择HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第____泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。 (4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的__________与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行__________培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。 【答案】(1)使细胞分散开　(2)XhoⅠ　(3)②　(4)抗体　传代 【解析】(1)胰蛋白酶的作用是消化组织细胞间的物质，使组织分散成单个细胞。(2)根据题意和图示分析可知：由于GDNF基因两边都有Xho Ⅰ限制酶识别序列，所以构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的Xho Ⅰ限制酶进行酶切。(3)选择HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示，由于GDNF基因中有BamHⅠ酶识别序列，所以图中第②泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。(4)为了检测GDNF基因是否成功表达，可利用抗原－抗体杂交技术，用相应的抗体与提取的蛋白质杂交，当培养的神经干细胞达到一定密度时，需进行传代培养以得到更多数量的细胞，用于细胞干细胞移植治疗实验。 4．(2014年新课标Ⅰ)某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如图所示。 若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到能不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。 回答下列问题： (1)制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上，则小鼠最少需要经过__________次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是__________小鼠，理由是_____________ __________________________________________________________________。 (2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有____________________________________________________________________________， 体系中出现多种类型细胞的原因是_______________________。 (3)杂交瘤细胞中有_________