发酵学 第2章 工业微生物的菌种选育.pptVIP

3.筛选 根据步骤可以分为初筛和复筛 初筛 量大，条件粗放。一个菌种进一个摇瓶。 复筛 条件要求应逐步提高。 每个菌株进3~5个摇瓶，如果生产能力继续保持优异，再重复筛选几次。 注意 亲株作对照。 复筛后的优良菌株要考查其稳定性、菌种特性和最适培养条件 根据操作方法可分为随机筛选和理性化筛选 随机筛选 理性化筛选 运用遗传学、生物化学的原理，根据产物已知的或可能的生物合成途径、代谢调控机制和分子结构来进行设计和采用一些筛选方法。从而打破微生物原有的代谢调控机制，获得能大量形成产物的高产突变株 经过诱变处理后，进行平板分离，随机挑选单菌落，筛选高产菌株 　　1）摇瓶筛选法 　　　单菌落→传种斜面→模拟发酵瓶→测定发酵能力 　　2）琼脂块筛选法 　　　打孔取块 → 鉴定平板测定发酵能力 → (须经摇瓶复筛) 随机筛选 3）筛选自动化和筛选工具微型化 随机筛选 96孔板高通量孵育筛选 随机筛选 1.初级代谢产物高产菌株的筛选　　　 ①筛选营养缺陷型 理性化筛选 理性化筛选 ②筛选细胞膜透性改变的突变株 使之大量分泌终产物，以降低细胞内终产物浓度，从而避免终产物反馈调节。 谷氨酸棒杆菌生物素营养缺陷型 细胞膜通透性 谷氨酸分泌至胞外 理性化筛选 ③筛选结构类似物抗性突变株　　　　　　 用与代谢产物结构类似的化合物处理微生物细胞群体，杀死