基因工程全精讲.ppt

检测 鉴定： ①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因 ②检测目的基因是否转录出了mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 方法—— 方法—— 方法—— DNA分子杂交 分子杂交 抗原抗体杂交 四、目的基因的检测与鉴定 一、DNA重组技术的基本工具 1．DNA重组技术的“分子手术刀” (1)“分子手术刀”即 。 (2)来源：主要从 中分离。 (3)功能：识别 、切割 。 (4)结果：产生 或 。 限制性核酸内切酶 原核生物 特定核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 平末端 归纳总结： 2．E·coli DNA连接酶与T4DNA连接酶 (1)化学本质： 。 (2)功能上的相同点：均可催化形成 。 (3)功能不同点： 可“缝合”黏性末端和 平末端， 则只能缝合“黏性末 端”，不能缝合平末端。 均为蛋白质 磷酸二酯键 T4DNA连接酶 E·coli DNA连接酶 3．基因工程常用的载体 基因工程常用载体是 ，其化学本质是 。 二、基因工程的基本操作程序 1．获取目的基因的手段 ①从 中获取； ②利用PCR技术扩增目的基因； ③通过DNA合成仪用化学方法直接合成。 质粒 一种双 链环状DNA分子 基因文库 2．基因工程的核心 (1) 是基因工程的第二步，也是基 因工程的核心。 (2)基因表达载体的组成：除目的基因外，还必须有 、 和 等。 ①启动子：是一段有特殊结构的 ，位于 ，是 的部位。 ②标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有 ，从而 。 基因表达载体的构建 DNA片段 启动子 终止子 标记基因 基因首端 RNA聚合酶识别和结合 目的基因 将含目的基因的细胞筛选出来 3．将目的基因导入受体细胞的方法 (1)植物最常用： 法，其次为 法、 法。 (2)动物：最常用 法，其受体细胞通常为 。 (3)细菌： 法，需用 处理细胞。 农杆菌转化 基因枪 花粉管通道 显微注射 受精卵 感受态细胞 Ca2＋ 4．目的基因的检测和鉴定 (1)首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。 (2)其次还要检测 。 (3)最后检测 。 (4)有时还需进行 。 目的基因是否转录出了mRNA 目的基因是否翻译出了蛋白质 个体生物学水平的鉴定 1.如图所示为部分双链DNA片段，下列有关基因工程中工具酶功能的叙述错误的是 (　　) A．切断a处的酶为限制性核酸内切酶 B．连接a处的酶为DNA连接酶 C．切断b处的酶为DNA解旋酶 D．连接b处的酶为RNA聚合酶 课堂反馈 D 2．下列有关基因工程操作的叙述中，正确的是 A．用同种限制性核酸内切酶切割载体与目的基 因可获得相同的黏性末端 B．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目