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- 2017-01-31 发布于重庆
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自由基及检测方法
ESR
电子顺磁共振(EPR)或称电子自旋共振(ESR)现象最早发现于1944年。它利用具有未成对电子的物质在磁场作用下吸收电磁波的能量使电子发生能级间的跃迁的特征,对顺磁性物质进行检测与分析。
自旋捕集方法是将不饱和的抗磁性化合物(自旋捕集剂)加入反应体系,与反应体系中产生的各种活性高、寿命短的自由基结合形成相对稳定的自旋加合物,以适于ESR检测
其原理是利用适当的自旋捕捉剂与活泼的短寿命自由基结合,生成相对稳定的自旋加合物,可以用电子自旋共振波谱法检测自旋加合物的数量,利用自旋加合物的数量来计算原来自由基的多少。
H: ?
V:ESR测自由基是怎么被检测的(细胞,组织,溶液?体内,体外?)
(MGD)2 - Fe2 +,是含有 10mmol·L- 1MGD 和2mmol·L- 1FeSO4的溶液。
体外捕集:处死后取组织(血液、细胞),加入捕集剂,ESR测定
体内捕集:腹腔注射捕集剂,处死取组织(血液、细胞),ESR测定
腹腔注射几乎没有检测到自由基信号,或者信号很弱,而处死后样品加捕获剂则可以检测到自由基信号。
通用捕获剂
典型的自旋捕捉剂是亚硝基化合物或氮氧化合物,把足够量的自旋捕捉剂加入到产生自由基的体系中,自旋捕获剂就会快速地和任何出现的自由基反应,最后给出稳定的可检测的氮样氧自由基加合物。所形成的自由基加合物的ESR 谱上有被捕自由基基因给出的超精细分裂,可鉴别
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