2.结果与分析.doc

影响银杏种核贮藏的研究 银杏(Ginkgo biloba L.)又名鸭掌子、白果、公孙树，系裸子植物银杏科银杏属种落叶乔木，具有较高的研究、栽培和开发利用价值[1]。银杏的种核俗称白果，包括骨质的中种皮、膜质的内种皮和营养丰富的胚乳和胚。国内外有关银杏种核贮藏技术的研究日益得到重视，已有研究报道采后的处理措施主要有热激处理、冷激处理、涂膜处理、电离辐射等，贮藏方法主要有室内干藏、冷冻贮藏、水藏、露天坑藏等。虽然通过试验提出了银杏种核贮前预处理及控制贮藏环境的方法，但仍存在不足选用银杏核用主栽品种佛指和洞庭皇的种核为试验材料。试验树在江苏省姜堰市果林场，常管理和采收。种实采收后，脱去外种皮，种核用清水洗净，除去空果、瘪果及虫果等，再用10%食盐水浸泡30min后，用自来水冲洗干净，置于晾干备用。 .2 处理设计表1 银杏种核贮藏处理的正交设计排列 Table 1 Arrangement of the orthogonal design for the seed stong storage of Ginkgo biloba L. 处 理 水 组 平 合 A B C D 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 1.3 测定分析 每品种随机取8000粒种核，分别进行各个试验组合的处理，每处理重复3次，处理后每隔20d随机抽取种核30粒，分别进行各项指标的测定分析。 .3.1 种仁可溶性糖含量测定 图1　葡萄糖标准曲线葡萄糖标准曲线制作[] 准确称取0.1000g葡萄糖，在80℃烘箱中烘8h，用蒸馏水溶解并定容至1000ml，即成0.1mg/ml葡萄糖母液，分别吸取0.0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml的葡萄糖母液于试管中，再加入蒸馏水2.0、1.6、1.2、0.8、0.4、0ml，以下操作同可溶性糖的测定，算得标准曲线为y^=0.6541x-0.0075(R2=0.9912**)。 样品测定 采用蒽酮法[]。取烘干后的种仁，磨碎，过80目筛，称取0.10g，共3份，分别放入3支刻度试管中，加入8ml80%乙醇，塑料薄膜封口，于80℃热水中提取30min，2500r/min离心20min,上清液倒入25ml容量瓶中（提取3次），定容至刻度。吸取样品提取液0.5ml于20ml刻度试管中（重复3次），加蒸馏水1.5ml，0.5ml蒽酮乙酸乙脂试剂和5ml浓硫酸，充分震荡，立即将试管放入沸水中，逐管准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白做参比，在630nm波长下测其光密度。根据标准曲线可计算出可溶性糖的含量，可溶性糖含量（mg/g）=标准曲线上算得葡萄糖的mg数×稀释倍数/样品重（g）。.3.2 种仁淀粉含量的测定淀粉标准曲线制作[] 准确称取0.1000g纯淀粉，在80℃烘箱中烘8h，放入100ml容量瓶中，加60~70ml热蒸馏水，放入沸水中煮沸0.5h，冷却后加蒸馏水稀释至刻度，则每毫升含淀粉1mg，吸取此液5.0ml，加蒸馏水稀释至50ml，即为0.1mg/ml淀粉标准液，分别吸取0.0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 ml的淀粉标准液于试管中，再加入蒸馏水2.0、1.6、1.2、0.8、0.4、1.0ml，测定方法同可溶性糖标准曲线测定，算得标准曲线为y=8.8238x-0.0815 （R2 =0.9929﹡﹡）。 样品测定 采用蒽酮法[]，在提取可溶性糖以后的残渣中加2ml蒸馏水，搅拌均匀后80℃水浴30min以除去乙醇，后沸水中糊化15min，取出后在冰水中冷却，加入在冰箱中预冷的9.2mol/L高氯酸2ml，搅拌15min，再加入4ml蒸馏水混匀，2500r/min离心10min，上清夜移入50ml容量瓶中，沉淀再加2ml冷9.2mol/L高氯酸2ml，搅拌15min，加6ml蒸馏水混匀，2500r/min离心10min，上清移入50ml容量瓶中，再加6ml蒸馏水清洗沉淀，2500r/min离心10min，重复2次，上清液转移至容量瓶，用蒸馏水定容。测定方法同可溶性糖测定。 图2　淀粉标准曲线 Fig.2.3.3种仁氰化物含量的测定[6] 主要仪器和试剂 EA-940离子计，氰离子选择性电极，甘汞电极(江苏电分析仪器厂)，a-淀粉酶300U/mL，β-淀粉酶280 U/mL(生化试剂)，0.025 mol/L KH2PO4+0.025 mol/L Na2HPO4缓冲液(pH＝6. 9)，67ug/ml的CN－1标准溶液，去离子水，试剂均为分析纯。 图3.　氰化物含量的标准曲线 Fig.3cyanid