蛋白质与酶工程第一章绪论分解.ppt

（二）酶的组成 酶 单纯酶 结合酶 （全酶）= 酶蛋白 + 辅因子 辅因子 辅酶 与酶蛋白结合得比较松的小分子有机物。 辅基 与酶蛋白结合得紧密的小分子有机物。 金属激活剂 金属离子作为辅助因子。 酶的催化专一性主要决定于酶蛋白部分。 辅因子通常是作为电子、原子或某些化学基团的载体。 （三）单体酶、寡聚酶和多酶复合物 1.单体酶（monomeric enzyme)：仅有一条具有活性部位的多肽链，全部参与水解反应。 2.寡聚酶 (oligomeric enzyme)：由几个或多个亚基组成，亚基牢固地联在一起，单个亚基没有催化活性。亚基之间以非共价键结合。 3.多酶复合物 (multienzyme system)：几个酶镶嵌而成的复合物。这些酶催化将底物转化为产物的一系列顺序反应。 丙酮酸脱氢酶系（E.coli）：丙酮酸脱氢酶（EⅠ）、硫辛酰转乙酰酶（EⅡ）和二氢硫辛酰脱氢酶（EⅢ）。 EⅠ EⅡ EⅢ 碱性 EⅠ EⅡ EⅢ + EⅡ EⅢ + 脲 (四) 活性部位和必需基团 必需基团：这些基团若经化学修饰使其改变，则酶的活性丧失。 活性部位：酶分子中直接与底物结合，并和酶催化作用直接有关的部位。 必需基团 活性部位 维持酶的空间结构 结合基团 催化基团 专一性 催化性质 酶的活性中心(active center) 又称活性部位(active site)，具有特定空间结构的区域，能与底物特异结合并将底物转化为产物。 酶作用的专一性 相对专一性 （族（基团）专一性） 绝对专一性 (五) 酶作用的专一性 相对专一性：可作用于一类或一些结构很相似的底物。 绝对专一性：只能作用于某一底物。 酶的催化效率通常比非催化反应高108～1020倍，比一般催化剂高107～1013倍。 2H2O2 2H2O + O2 1mol过氧化氢酶 5×106molH2O2 1mol离子铁 6×10-4molH2O2 (六)酶促反应具有极高的效率 酶的催化作用受到底物浓度、酶浓度、温度、pH值、激活剂浓度、抑制剂浓度等诸多因素的影响。在酶的应用过程中，必须控制好各种环境条件，以充分发挥酶的催化功能。 (七) 影响酶催化的各种因素 1、底物浓度的影响 影响酶催化作用的因素 Ｖ Vmax[S] Km + [S] ＝ ── [S]：底物浓度 V：不同[S]时的反应速度 Vmax：最大反应速度(maximum velocity) Ｋm：米氏常数(Michaelis constant) 2 酶浓度对反应速度的影响 当[S]＞＞[E]，酶可被底物饱和的情况下，反应速度与酶浓度成正比。 关系式为：V = K3 [E] 0 V [E] 当[S][E]时，Vmax = k3 [E] 酶浓度对反应速度的影响 双重影响 温度升高，酶促反应速度升高；由于酶的本质是蛋白质，温度升高，可引起酶的变性，从而反应速度降低 。 3、温度对反应速度的影响 最适温度 (optimum temperature)： 酶促反应速度最快时的环境温度。 * 低温的应用 酶 活 性 0.5 1.0 2.0 1.5 0 10 20 30 40 50 60 温度 oC 温度对淀粉酶活性的影响 4、pH对反应速度的影响 最适pH (optimum pH)： 酶催化活性最大时的环境pH。 0 酶 活 性 pH pH对某些酶活性的影响 胃蛋白酶 淀粉酶 胆碱酯酶 2 4 6 8 10 pH对酶作用的影响机制： 1.环境过酸、过碱使酶变性失活； 2.影响酶活性基团的解离； 3.影响底物的解离。 5、抑制剂的影响 酶的抑制剂(inhibitor) 凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白 变性的物质称为酶的抑制剂。 区别于酶的变性 抑制剂对酶有一定选择性 引起变性的因素对酶没有选择性 6、激活剂对反应速度的影响 激活剂(activator) 使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质。 ? 必需激活剂 (essential activator) ? 非必需激活剂 (non-essential activator) (八)酶活性测定和酶活性单位 回本章目录 酶的活性是指酶催化化学反应的能力，其衡量的标准是酶促反应速度。 酶促反应速度可在适宜的反应条件下，用单位时间内底物的消耗或产物的生成量来表示。 酶的活性单位是衡量酶活力大小的尺度，它反映在规定条件下，酶促反应在单位时间（s、min或h）内生成一定量（mg、μg、μmol等）的产物或消耗一定数量的底物所需的酶量。 国际单位(IU) 在特定的条件下，每分钟催化1μmo