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饲用酶制剂理化特性及评定 武汉新华扬生物有限公司 饲用酶制剂基本理化特性 酶制剂应用效果评定 1、稳定性 测定酶在湿热条件下的稳定性 HY-Nutrex细菌性木聚糖酶储存稳定性 对抑制剂敏感性 体外分析酶对抑制剂的敏感性 对动物消化道内环境的抵抗力 体内法 是将酶制剂添加到动物饲粮中喂动物，在采食一定时间后进行动物屠宰，取消化道各段食糜，测定酶活。 HY-Nutrex细菌木聚糖酶 最适pH活性范畴：偏中性 HY-Nutrex细菌木聚糖酶 在动物体内酶的活性/作用 2、底物针对性 广义的底物专一性 狭义的底物专一性 针对饲料原料中不同的底物化学构成选择酶解特性不同的酶制剂 饲用酶制剂底物针对性的评定 体外法 体外消化模拟方法 体外模拟动物消化道环境是非常有难度的，因为动物消化道内环境是一个动态变化的复杂环境，它受到很多因素（包括动物种类、动物生理阶段、动物机体状态、日粮类型等）的影响。 粘度试验 HY-Nutrex酶对小麦粘度的作用 动物生产性能试验 通过科学的试验设计，在动物日粮中添加酶制剂，统计分析动物的生产性能来反映酶制剂的作用 动物生产性能试验是评价酶制剂优劣的最直接、最具说服力的方法 关于体外酶活测定 酶活的定义 酶活性的测定，可以用测定特定底物（天然提取或人工合成）的消失率，或测定酶催化的生化反应的产物的生成量来衡量也可以用合成底物来测定酶的活性 温度对酶活性的影响 测定温度一般为30－55 ?C，动物体内的温度在40 ?C左右 pH值对酶活性的影响 底物类型对酶活性的影响 底物浓度对酶活性的影响 不同提取液对各类植酸酶提取效果 体外测定酶活的条件与酶在动物体内发生作用的条件有天壤之别（温度、PH、底物组成结构、底物浓度、底物存在形式） 现用的DNS检测法（真菌木聚糖）尚不能评估出细菌性木聚糖酶的酶活及生物学（饲用）效果 内切木聚糖酶作用模型 阿拉伯木聚糖 A A A A A A A A  X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X 内切木聚糖酶的测定 经染色并绞连的小麦阿拉伯木聚糖 (特点:高度纯化,不可溶于水) 酶的含量不能直接用重量或体积来表示，常用它催化某一特定反应的能力来表示：酶活 测定酶活的因子: pH值,温度,底物浓度及类型,时间,产物数量表述方式 表述: 时间:s;min;hr;30min 底物浓度:1g/100ml;2g/100ml;3g/100ml;4g/100ml 终产物:mg;ug;ng;mmol;umol;nmol 酶活(u/g)= 产物量及类似物 加酶量×时间 酶活性的测定方法 还原糖法 粘度法 底物染色法 不同的测定条件（温度、pH、底物及底物的浓度等）会得到不同的测定结果。 在目前条件下，采用体外酶活测定的方法评定酶制剂的优劣具有很大的局限性，不具有实际应用意义 温度对两种?－葡聚糖酶活性的影响(pH 5, 1.0% 底物) 温度 酶活性 (U/g) 两种?－葡聚糖酶的活性在30 ?C下测定时很接近，但在40 ?C下，其差异变大，随着温度的升高，差异会更大 pH对两种?－葡聚糖酶活性的影响 (30oC, 1.0% 底物) 酶活 典型木聚糖酶及?－葡聚糖酶活性测定的pH为4.8－5.5;消化道内pH: 胃为2－2.5，小肠为6.0－7.0 在pH为5时，两种葡聚糖酶的活性相近，但高于5或小于5时，其差异非常大，只展示在pH为5时的测定结果是不够的 616 921 3022 5570 1960 650 酶 A 酶 B 酶 C 桦木木聚糖底物 燕麦木聚糖底物 酶的活性 (U/mg) 不同底物对三种木聚糖酶活性的影响 从逻辑上讲，如果动物饲喂的基础日粮以小麦或玉米为主，测定木聚糖酶的活性应该分别用小麦或玉米木聚糖为底物? 底物浓度对两种木聚糖酶活性的影响 (pH 5, 50oC) 底 物 浓 度 (毫克/毫升) 酶活性 (U/g) 动物消化道内底物的浓度一般为1－2毫克/毫升 950 834 2107 4607 提取液Ⅴ 6059 4865 4780 5234 提取液Ⅳ 2887 1897 3020 4819 提取液Ⅲ: 2129 3603 2440 4505 提取液Ⅱ 6111 5144 2851 4567 提取液Ⅰ 实 测 值 (u/g) 600