亚慢性毒性作用.pptVIP

研究方法 观察指标（慢性） 以亚慢性毒性实验所提供的毒效应和靶器官为基础，优先其筛选出来的敏感或特异性指标 组织病理学检查非常重要，必不可少 迟发、可逆性，停止染毒后1-2月 观察指标 检查项目 一般观察 实验室指标 系统尸解 组织病理学 可逆性观察 其他特殊检查 研究方法 观察指标 一般观察 常常能综合反映毒物对机体的毒作用，应详细记录，往往是敏感的综合毒效应指标，仔细分析，从中发现化学毒物的毒性特征 每日观察进食量、体重，外观体征和行为活动粪便性状等 有中毒反应的动物取出笼单独饲养，观察 死亡或濒死及时尸检 研究方法 观察指标 一般观察：动物体重 重要的且敏感、客观的指标，反映生长发育及一般状态的影响 受试组动物体重增长比对照组低10%，提示是由受试物引起的毒效应 各组存在剂量-反应关系，则可以肯定是一种毒性效应 直接体重、增长重量、体重百分增长率 研究方法 观察指标 一般观察：饲料消耗量 每周观察记录饲料消耗量 食物利用率：每食入100g饲料所增长的体重克数（g体重/100g饲料） 结合分析体重指标和食物利用率分析 研究方法 观察指标（实验室检查） 血液学检查 红细胞计数、血红蛋白含量、白细胞计数及分类、血小板计数、凝血时间等 血液生化指标 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、血糖(GLU)、总胆红素(T-BIL)、肌酐(Crea)、总胆固醇(T-CHO)等 研究方法 例如OECD关于食品添加剂的要求 ADI （Acceptable daily intake ）： 确定“ 未观察到反作用剂量”（ NOAEL ）， 也就是用最敏感的动物做实验，从而确定与人体健康相关的最敏感的不良作用。因此， NOAEL 值是指某一种添加剂在研究中未观察到不良反应的最大摄入量 ， 以毫克添加剂每千克体重每天（ mg/kg 体重 / 天）表示。 NOAEL 值除以 一个系数，通常是 100 ，就得到一个相当低的 人体允许 摄取和很大的安全富余。 NOAEL与LOAEL 实验动物 1 啮齿类（rodent species） 小鼠：昆明种、C57、Balb/c、ICR 大鼠：Sprague-Dawley（SD）、Wistar 2 非啮齿类（nonrodent species）：兔、犬、猴 3 实验动物的遗传均一性：近交系杂交群封闭群 基本原则- 实验动物-级别 　 等级 饲养环境 要求 I级 普通动物 开放系统 应没有传染给人的疾病 II级 清洁级 屏障系统 种系清楚，没有该动物特有的疾病 III级 无特定 病原体动物 屏障或 隔离系统 没有致病病原体 IV级 无菌动物 隔离系统 在全封闭无菌条件下饲养的纯系动物， 动物体外不带有任何微生物与寄生虫 无特定病原体（Specific pathogen Free, SPF） 基本原则- 实验动物-级别 基本原则- 动物选择-3R原则 减少（Reduction） 替代（Replacement） 优化（Refinement） 基本原则-染毒 染毒途径：消化道、呼吸道、皮肤、注射 工业毒物：经呼吸道、皮肤 农用化学物：经口、皮肤、呼吸道 药品：经口、注射、皮肤 食品：经口 环境污染物：经口、呼吸道、皮肤 与人群实际接触相似的途径！ 经口染毒 途径：灌胃法、喂饲法、胶囊法 大小鼠建议灌胃，犬胶囊法或灌胃法 喂饲法：保证受试物均匀混合，且稳定，对掺入最大量有规定 经呼吸道 注射 基本原则-染毒方式 毒代动力学血药浓度监测！ 第一节 急性毒性作用 急性毒性的概念 急性毒性（acute toxicity） 机体一次或24h内多次接触外源化学物后在短期内（最长14天）所产生的毒性效应，包括一般行为和外观改变、大体形态变化以及死亡效应 经典急性毒性试验的目的 急性毒性试验的目的 求出半数致死剂量(LD50)及其他急性毒性参数 观察中毒表现、毒作用强度和死亡情况，初步评价毒物的毒效应特征 为其他毒理试验提供接触剂量和选择观察指标的依据 LD50的几种计算方法（经典的急性毒性试验） 概率单位法 霍恩法（Horn） 改进寇氏法 急性毒性研究方法 局限性 1. 消耗的动物量大 2. 获得的信息有限 3. 测得的LD50仅仅是一个近似值 4. 在安全性评价中仅评价动物死亡和简单的症状观察是不够的，更需要的是生理学、血液学及其它化验检查所提供的深入细致的毒性信息。 OECD推荐的替代方法 替代方法 固定剂量法 急性毒性分级法 上-下移动法 不以死亡为观察终点； 利用预先选定的或固定的一系列剂量染毒，从而观察化学物