多重连接探针扩增mlpa的原理及撇慰间应用.pptVIP

98 oC 加热80分钟 98 oC 加热20分钟 98 oC 加热5分钟 由于MLPA探针识别序列仅约70nt，因此可用于DNA碎片的检测，即使长时间的对DNA样品加热导致其断裂也不会对最终检测结果造成大影响。 可检测降解DNA Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. MLPA工作流程 变性 样品DNA在98度下加热5分钟。 杂交 往变性后的样品中加入 SALSA 探针混合液和MLPA 缓冲液。 混合体系在95度下加热1分钟后，在60度下温浴杂交16个小时。 连接 在杂交产物中加入连接酶混合液在54度下温浴连接15分钟 。 98度加热5分钟使连接酶失活。 PCR 加入引物，dNTP和DNA聚合酶。 PCR反应。 毛细管电泳 将扩增片段长度和结果峰导入到excel表中。 分析结果。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 杂交 溶液体积: 8 μL 杂交时间 60 °C杂交16小时，即使是延长到20小时也可以。