第二章 植物离体培养育种 第一节 组织培养概论幻灯片.pptVIP

愈伤组织培养是最为常见的组织培养方式 愈伤组织（Callus）： 原指植物在受伤后，于伤口表面形成的一团薄壁细胞。 在组织培养中，指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 原因： 大部分组织培养经历callus再生途径长出植株； callus可以用于悬浮培养和原生质体培养。 外植体（Explants） 由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官 初代培养（Primary culture） 继代培养（Subculture） 指外植体的最初培养 将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中，这种反复多次移植的培养，称为继代培养 * * 第二章 植物离体培养育种  Tissue culture and breeding §1 植物离体培养发展简史、意义和生物学原理 组织培养的概念 组织培养（Tissue culture）是指用无菌方法使植物体的离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有培养技术的总称，也称之为离体培养（In vitro culture）。 利用植物体的器官、组织或细胞，通过无菌操作接种于人工配制的培养基上，在一定的光照和温度条件下进行培养，使之生长发育的技术称为组织培养 发展简史 1838-1839年，德国科学家Schleide 和Schwann发表了细胞学说，奠定了组织培养的理论基础。 1902年，德国植物学家Haberlandt 根据细胞学说，提出单个细胞的植物细胞全能性（totipotency）理论。 1904年，Hanning 最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。 1922年，Knudson 采用胚培养法获得大量兰花幼苗。 1934年，White 用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无性繁殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。 1958年，英国科学家Steward 等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养的技术程序奠定了基础。 1962年，Murashinge 和Skoog 在烟草培养中筛选出至今仍被广泛使用的MS培养基。 1964-1966年，印度科学家Guha 和Maheswari 在曼陀罗花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。 1972年，Carlson 通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。 发展简史 植物组织培养在技术上的发展 研究材料范围逐步扩大 培养方法逐步完善 培养基不断改进 实验手段逐步完备 胚、胚轴、子叶、幼苗、茎尖、根、叶等； 动物细胞+植物细胞/微生物原生质体 固体培养发展到液体振荡或旋转培养 悬浮培养、液滴培养、双层培养、包埋培养 White培养基、MS培养基、MT培养基等 植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。 细胞全能性（cell totipotengcy）学说 植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，在一定条件下具有发育成为完整植株的潜在能力。 生物学原理 潜在全能性的原因：基因表达的选择性 科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。人工条件下实现的这一过程，就是植物组织培养。 生物学原理 生物学原理 植物的再生作用：植物的根、茎、叶等器官、组织和细胞都具有再生成完整植株的能力。其是无性繁殖的基础，它是受内源激素调控的。人工控制和调整培养基成分，可使其发育成完整的植株。 细胞的分化和形态发生：指细胞在分裂过程中发生结构和功能方面的改变，从而在植物个体发育过程中形成各类组织和器官，完成整个生活周期。 植物细胞全能性的表达 脱分化（dedifferentiation)：将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的分裂活性。 再分化（redifferentiation):经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 植物组织培养过程 组织培养的特点 植物基础学科研究的良好系统 为植物学、细胞生物学、生物化学、植物生理学、微生物学、植物遗传育种、生物制药等学科的研究提供了基础知识、理想的离体研究条件。 生物技术的基础 21世纪是生命科学的世纪，而生命科学的巨大作用是要依靠新的技术方法的推动才得以实现 新技术：生物技术 核心