实验二肠杆菌科细菌的分离鉴定Ⅰ(培养基制备)课题.ppt

实验二 肠杆菌科细菌的分离鉴定Ⅰ （培养基制备） （一）目的要求 1．掌握各种培养基制备的原则、要求 2．熟悉各种培养基制备的过程 3．学会培养基酸碱度的测定 4．熟悉各种灭菌方法及适用范围，掌握高压蒸汽灭菌操作法及注意事项。 （二）实验内容 1．制备常用培养基：包括普通琼脂培养基、普通肉汤培养基、厌氧肝汤培养基等。 2．制备鉴别培养基：麦康凯培养基、伊红美兰培养基、三糖铁培养基等。 3．制备生化培养基。 4．培养基的处理：高压蒸汽灭菌及无菌检查。 制作培养基的一般要求 1、必须含有细菌生长所需的营养物质。 2、不能含有抑制细菌生长的物质。 3、pH值必须符合细菌生长的要求。 4、所制备的培养基必须清亮透明。 5、必须彻底灭菌，不能含有活的细菌。 （三）操作过程 1、普通肉汤培养基 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g 氯化钠 5g 磷酸氢二钾 1g 蒸馏水 1000mL 称好材料混合 加热溶解 测pH(7.4-7.6) 滤纸过滤2-3次 分装(约5mL/支) 包装 高压灭菌 2、厌氧肝汤培养基 取试管35支 每管加肝粒5－6粒 加普通肉汤约5mL 加液体石蜡约1mL 包装 高压灭菌 3、普通琼脂培养基 按说明直接取营养琼脂粉40g加入1000mL蒸馏水中，加热溶解，补充水分到原量，分装试管，剩下的装三角瓶，包装，高压灭菌。 4、鉴别培养基 麦康凯培养基 伊红美兰培养基 三糖铁培养基 以上三种培养基均按说明配制，前两种装三角瓶，后一种分装试管，包装， 高压灭菌(10磅10min) 。 5、生化培养基 （1）糖发酵培养基（每种100ml/30人） 蛋白胨 1 g NaCL 0.5g 水 100ml 糖 1 g 称好材料混合，加热溶解，测pH(7.4-7.6)，加1.6%溴甲酚紫，分装(约3-5mL/支)，包装，高压灭菌。 （2）蛋白胨水（100ml/30人） 蛋白胨 1 g NaCL 0.5g 水 100ml 称好材料混合，加热溶解，测pH(7.4-7.6) ，分装(约3-5mL/支)，包装，高压灭菌。 （3）葡萄糖蛋白胨水（200ml/30人） 葡萄糖 0.5g 蛋白胨 0.5g NaCL 0.5g 水 100ml 称好材料混合，加热溶解，测pH(7.4-7.6) ，分装(约3-5mL/支)，包装，高压灭菌。 * * * * * * *