第十二章_高效液相色谱法.ppt

第十二章 高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography） * * §1 概述 一、现代HPLC的特点 由的 （1）高压：液体作流动相，流经色谱柱时所受的阻力大， 为加速，配备高压输液设备 （2）高速：分析时间为几~几十分钟 （3）高效：塔板数30000块/米，普通色谱法几千块/米 （3）高灵敏度：紫外检测器：检测限10-9g/mL 荧光检测器：检测限10-13g/mL 二、HPLC与GC的区别 1. 分析对象范围广 GC：对象：气体或低沸点的化合物，占20% HPLC：可用于沸点高、摩尔质量大、热稳定性差的物质，占80% 2. 流动相选择余地大，并对组分有亲和力，可增加选择性 GC：惰性气体，对组分无亲和力 HPLC：不同极性液体，对组分有亲和力，与固定相竞争组分， 可提高选择性 3. GC：高温 HPLC：室温 缺点：仪器昂贵，操作严格 §2 理论基础 一、涡流扩散项A 使用颗粒较小且均匀的固定相可提高柱效 二、纵向扩散项B/u r：阻塞因子（常数），大小与组分在色谱柱中的扩散程度有关 Dm：组分分子在流动相中的扩散系数 Dm只有Dg的万分之一～十万分之一，当u≥0.5cm/s