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- 2017-02-08 发布于上海
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人教版生物选修一课题1DNA的粗提取与鉴定教学1
课题1 DNA的粗提取与鉴定 * 1.DNA的释放:利用鸡血细胞在蒸馏水中渗透吸水过度导致细胞膜和细胞核膜的破裂,得到含有DNA的溶液。 2.析出DNA:DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低; 3.提取DNA:DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质则可以溶于酒精,利用此可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 5.鉴定DNA:DNA+二苯胺(沸水浴)→蓝色 一、实验原理 4.纯化DNA:DNA不被蛋白酶分解,DNA和蛋白质对高温的耐受性不同,利用此最大限度地将DNA与杂质分开。 二、方法与过程 1.制鸡血细胞液(活鸡鲜血经分离或沉淀获得) 0.1g/mL柠檬酸钠100mL 活鸡鲜血180mL 500mL烧杯中,玻棒搅拌,离心、分离或静置沉淀。 2.提取DNA ①取血细胞5-10mL+20mL蒸馏水,用玻棒沿一个方向快速搅拌。 ②纱布过滤:滤液中含DNA和其他核物质(如蛋白质) ③原理:血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破,玻璃棒快速搅拌,机械加速血细胞破裂。 (1)提取血细胞核物质: (2)溶解核内的DNA: 滤液+2mol/L的NaCl溶液40mL,玻棒沿一个方向轻缓搅拌。 (3)析出含DNA的粘稠物: (4)滤取含DNA的粘稠物: (5)DNA粘稠物的再溶解: 在上述溶液
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