动物细胞工程.pptVIP

动物细胞工程 一、动物细胞培养 问题： 1.为何要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来？ 2.比较动物细胞培养和植物组织培养所用的培养基的成分. 3.动物细胞培养是否能像植物细胞一样 最终培养成新个体？ 二、动物细胞融合 三、单克隆抗体 * * 离体植物器官、组织或细胞 愈伤组织 胚状体 植物体 脱（去）分化 再分化 （芽、根） 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养 使用的培养基： 固体 有机物（蔗糖） 植物激素 植物体细胞杂交 植物细胞A 植物细胞B 去细胞壁 原生质体融合 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 植物组织培养 植物细胞融合 1、植物体细胞杂交的结果 是产生了？ 2、这个过程中涉及的原理是？ 杂种植株 细胞膜的流动性 植物细胞的全能性 多莉 克隆猴 动物细胞工程 常用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 胚胎移植 核移植 1.过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 （单个细胞） 胰蛋白酶 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 （分解弹性纤维） 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 遗传物质未改变 遗传物质改变 接触抑制 剪碎 获得细胞 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 2、植物组织培养和动物细胞培养的比较 3.动物细胞培养技术的应用 （1）生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （3）用于检测有毒物质 （2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据 1.过程： 诱导 细胞膜穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂种细胞 诱导方式 物理法 化学法 生物法： 灭活的病毒 仙台病毒 紫外线 丧失感染性 （不感染细胞） 保留融合活性 （诱导细胞融合） 2、诱导的过程： 3、原理 细胞膜的流动性 4、用途：制备单克隆抗体 动物细胞融合相当于植物体细胞杂交的原生质体融合过程 单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖 抗体: 化学性质单一、特异性强 原始的方法获得抗体，特异性差，纯度低。 想获得单一抗体，必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，通过克隆形成细胞群。 问题：体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增值的，如何使单个淋巴细胞增殖呢？ 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖 杂种细胞 根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的 实验方案: 1、单克隆抗体制备过程 注射 抗原 效应B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 诱导其融合的方法有哪些？ ？ ？ 抗原 效应 B细胞 筛选 筛选 AA型、BB型 AB型杂交瘤细胞 能产生所需抗体的细胞 杂交瘤细胞 2 单克隆抗体的应用： ①在基础理论研究中具有重要意义 ②在疾病诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，具有产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显 ③作为载体，运载抗癌药物，制成生物导弹 四 动物的胚胎移植技术 解决某些妊娠时间长、每胎产子数量少的优良种畜的繁殖速度问题。 卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 多莉羊的培育过程 融合后的卵细胞 1.动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于 A、培养基不同 B、动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C、动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D、动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株 * * *