基因工程 考试重点.docVIP

1.简述基因工程四大要素的作用及基因工程操作步骤 目的基因、运载体、工具酶、受体细胞 1.获取目的基因 2.基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合） 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因导入受体细胞后，检测与鉴定是否可以稳定维持和表达其遗传特性 2.构建cDNA基因文库基本过程是怎样的 a.细胞总RNA的提取和mRNA分离 b.第一链cDNA合成 c.第二链cDNA合成 d.双链cDNA克隆进质粒或噬菌体导入宿主细胞进行繁殖 3.基因工程中常用的酶类有哪些，有何作用 限制性核酸内切酶 基因的剪刀 连接酶 连接DNA分子 聚合酶 合成DNA分子 修饰酶 甲基化酶 4.基因工程在生产实践中有何应用 农业：抗逆性转基因植物 农药生产 医学：基因诊断 基因治疗 抗生素 环境：环境监测 净化污染 5.关于转基因生物的争论　　 （1）转基因生物可能对环境质量、生态系统或生态系统的稳定性产生不利影响。（2）转基因生物可能对人体健康产生不利影响，严重的可以致癌和其他遗传病。（3）基因武器可能给人类带来毁灭性的危险。 6.影响DNA连接反应的因素有哪些 连接缓冲液 pH ATP浓度 连接温度与时间 酶浓度 DNA浓度 7.重组子的筛选与鉴定有哪些方法 遗传检测法（平板筛选） 分子检测法（PCR） 物理检测法（电泳） 免疫化学检测法 核酸序列分析 8.目的基因制备方法 从细胞