基因工程复习资料.docVIP

一章 基因工程的基本原理 增加外源目标基因的剂量（分子遗传学原理） ? 筛选和重构控制重组基因表达的转录调控元件，如：启动子、增强子、操作子、终止子、上游调 控序列等（分子生物学原理） ? 筛选和重构控制蛋白质生物合成的翻译调控元件，如：SD序列、mRNA非编码区、密码子等（分子生物学原理） ? 基因工程菌（微型生物反应器）的增殖及稳定生 产（生化工程学原理） 基因工程的基本步骤 ?1. 外源目的基因的获得(切)2.基因载体的选择和分离纯化3. 重组DNA分子的构建(接)4.重组DNA分子导入宿主细胞(转)极其扩增(增5.重组菌（克隆株系）的筛选、鉴定和分析(检6.工程菌的获得、下游工艺的优化和目的基因表达产物的分离纯化。 重组DNA技术的定义——指将一种生物体（供体）的基因分离出来，和载体DNA在体外进行酶切和连接，拼接产生重组DNA，然后导入另一种生物体（受体）细胞中使目的基因得以复制和表达，能够按照设计者的意愿稳定遗传和表达出新产物或新性状的DNA体外操作技术，又称为基因克隆或分子克隆（技术）。 复制：以原来的分子为模板，合成相同分子的过程。 转录（或逆转录）：按照碱基互补原则，以DNA（或RNA）为模板合成相应的RNA（或DNA）的过程。 翻译：通过核糖体，以mRNA为模板，氨酰tRNA运送氨基酸，按照氨基酸的三联体密码规则合成相应蛋白质的过程。 第二章 载体的功能包括