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- 2017-02-09 发布于天津
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实验碱性磷酸酶比活力测定
实验 碱性磷酸酶比活力测定 实验目的 掌握酶活性测定方法的一般原理方法 测定碱性磷酸酶制备各步骤酶制剂比活力 实验原理 酶活力:即是酶活性,是表示催化某一特定反应的能力。可以用在一定条件下所催化的某一特定化学反应速度表示。 酶催化的反应速度越快,酶活性越高,反之则愈低。 底物减少量或生成物增加量 酶促反应速度v = 单位时间 酶促反应进程曲线 要真实反映出酶活力的大小,就应该在产物生成量与酶反应时间成正比的这一段时间内进行初速度的测定。 活力测定中应注意的几个问题 (1) 活力测定一般测定产物增加速度为好。 (2) 测活过程应注意外界环境的影响。 a b =a/b 方法: 1.终止测定法(终点法) 终止测定法是在酶和底物反应达到预定的时间时,立即加入终止剂使酶变性,终止酶促反应,在这段反应时间里面,产物的生成量基本成线性增加,用这段反应时间内的平均速率代替反应初速率。 2.动力学分析法
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