第四章翻译教材分析.pptVIP

本章主要内容 一. 遗传密码——三联子 二. tRNA 三.AA- tRNA合成酶 四.核糖体 五. 蛋白质的生物合成 六.蛋白质运转机制 一. 遗传密码——三联子 1、遗传密码概况 2、密码破译 50-60年代破译遗传密码方面的三项重要成果： 3）氨基酸的“活化”与核糖体结合技术 氨基酸的“活化”：如果把氨基酸与ATP和肝脏细胞质共培养，氨基酸就会被固定在tRNA分子上，形成氨基酰-tRNA，催化该过程的酶为氨基酰-tRNA合成酶。 核糖体结合技术：以人工合成的三核苷酸如UUU、UCU、UGU或多聚核苷酸模等为模板，在含核糖体、AA-tRNA的反应液中保温后通过硝酸纤维素滤膜，只有游离的AA-tRNA通过滤膜，而核糖体或与核糖体结合的AA-tRNA则留在滤膜上。 3、遗传密码的性质 （1）起始码与终止码:密码子AUG是起始密码，同时也是蛋氨酸的密码子；少数细菌中也用GUG做为起始码。在真核生物CUG偶尔也用作起始蛋氨酸的密码。密码子UAA，UAG，UGA是肽链成的终止密码，不代表任何氨基酸。 （2）密码无标点符号：连续性。 （3）密码的简并性：　　 （4）密码的通用性：　 4、密码子和反密码子的相互作用 二． tRNA 100多种，各可携带一种氨基酸。 分子量最小的核酸:70～120bp. 结构上有共同特点. 10%～20%的稀有碱基，如：mG、mA，双氢尿嘧啶(DHU)、次黄嘌呤等,还含有一些稀有核苷，如：T、Ψ等。 ?tRNA在蛋白质合成中处于关键地位，被称为第二遗传密码。代表相同氨基酸的tRNA称为同工tRNA。 在一个同工tRNA组内，所有tRNA均专一于相同的氨基酰- tRNA合成酶。 1、tRNA的三叶草型二级结构 2．tRNA的L形三级结构 3．tRNA的功能 ①运输的工具，运载aa ②解读mRNA的遗传信息 4．tRNA的种类 （1）起始tRNA和延伸tRNA?????能特异地识别mRNA模板上起始密码子的tRNA叫起始tRNA，其他tRNA统称为延伸tRNA。原核生物起始tRNA携带甲酰甲硫氨酸（fMet），真核生物起始tRNA携带甲硫氨酸（Met）。 （2）同工tRNA （3）校正tRNA??? 校正tRNA分为无义突变及错义突变校正。??? 一个核苷酸的改变可能使代表某个氨基酸的密码子变成终止密码子（UAG、UGA、UAA），使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽，这种突变就称为无义突变。 三．AA- tRNA合成酶 氨基酰– t RNA表示法： Ala – tRNAala Met – tRNAimet ｆMet – tRNAiｆmet Met – tRNAｅmet 四．核糖体 核糖体是由几十种蛋白质和几种rRNA组成的亚细胞颗粒。 一个细菌细胞内约有20000个核糖体，而真核细胞内可达106个，在未成熟的蟾蜍卵细胞内则高达1012。 核糖体和它的辅助因子为蛋白质合成提供了必要条件。 rRNA是细胞内含量最多的RNA，约占RNA总量的80%以上，是核糖体的组成成分。 1.核糖体的组成 原核生物核糖体RNA 2/3,蛋白质 1/3。 真核生物核糖体RNA 3/5,蛋白质 2/5。 核糖体是一个致密的核糖核蛋白颗粒，可以解离为两个亚基，每个亚基都含有一个相对分子质量较大的rRNA和许多不同的蛋白质分子。 大肠杆菌核糖体: 小亚基由21种蛋白质组成，分别用S1……S21表示 大亚基由33种蛋白质组成，分别用L1……L33表示。 真核生物细胞核糖体大亚基含有49种蛋白质，小亚基有33种蛋白质。? 2、rRNA? 核糖体蛋白(rp)有数十种，大多是分子量不大的多肽类，分布在核蛋白体大亚基的蛋白称为rpl，在小亚基的称rps。 原核生物rRNA分为5S、16S、23S三种。 小亚基由16S rRNA 和21种rps构成 大亚基由5S、23S rRNA 和31种 rpl构成。 真核生物rRNA分为5S 、 5.8S、 18S、28S四种。 核蛋白体小业基含18S rRNA 和30多种rps 大亚基含28S、5.8S、5S三种rRNA，近50种rpl。 各种生物核蛋白体小亚基中的rRNA具有相似的二级结构。 3.核糖体的功能 核糖体至少有5个活性中心： ①mRNA结合位点 ②AA-tRNA结合位点 （A位） ③肽基转移位点（P位） ④肽酰-tRNA结合位点 ⑤转肽酶活性中心 此外还有各种延伸因子的结合位点。 核糖体可解离为亚基或结合成70S/80S颗粒。 翻译的起始阶段游离的亚基结合成70S/80S颗粒。 细胞中大多数核糖体处于非活性的稳定状态，单独存在，只有少数与mRNA一起形成多聚核糖体。 mRNA上