2动物细胞培养和核移植技术精品学案.doc

课题: 动物细胞培养和核移植技术 看书划下以下内容并记忆 1、动物细胞工程常用的技术手段有哪些？最基础的技术手段是？ 2、阅读“动物细胞培养”的相关内容，思考回答以下问题： （1）动物细胞培养的概念？实质？（2）总结动物细胞培养的过程。（3）进行细胞培养时，为什么首先将组织分散成许多单个细胞？（4）什么是细胞贴壁？培养贴附性细胞时，要求培养瓶或培养皿具备什么条件？（5）什么是细胞的接触抑制？如何打破接触抑制？（6）什么是原代培养？什么是传代培养？传代培养的细胞有什么特点？（7）进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？（8）体外培养细胞时需要提供哪些物质？（9）体外培养细胞时需要什么样的环境条件？如何保证这样的环境条件？（10）动物细胞培养技术有哪些用途？ 3、阅读“动物体细胞核移植技术和克隆动物”的相关内容，思考回答以下问题： （1）为什么不能直接利用动物细胞培育动物体？（2）什么是动物核移植？什么是克隆动物？ （3）哺乳动物核移植可以分为哪两种类型？ （4）为什么动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植？（5）以克隆高产奶牛为例，来说明体细胞核移植的大致过程。 （6）在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ （7）用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？ （8）你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？（9）体细胞核移植技术的应用有哪些方面？（10）体细胞核移植技术存在的问题？ 填出以下内容检查预习情况 一、动物细胞工程包括： 、 、 、 等。 二、动物细胞培养：（一）意义：是其它动物细胞工程的基础。 （二）概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成 ，然后在适宜的培养基上，让这些细胞 和 。 （三）理论基础： 。 （四）过程 说明： 1、动物细胞培养特点：生长时 、 。 细胞贴壁：在培养瓶中，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面 时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象叫做接触抑制。 2、分散成单个细胞的方法：剪碎、用 或 处理。 3、分散成单个细胞的目的：使细胞与培养液充分接触，便于吸收O2和营养物质，排出代谢废物。 4、原代培养：将动物组织消化后的 。（10代以内或分瓶之前） 5、传代培养： 的细胞继续培养。（10代以后或分瓶之后） 6、两次停止期：（1）10代左右有些细胞不能传代，有些细胞继续传代。 （2）50代左右绝大多数细胞死亡，部分细胞 发生变化，获得 ，朝着等同于 的方向发展，无限增殖。 7、细胞株：50代以内原代培养和传代培养的细胞群。 8、细胞系：50代以后传代培养的细胞群。 （五）动物细胞培养的条件：1、 、 环境。（培养液和培养用具无菌处理、添加抗生素；定期更换培养液，以便清除细胞代谢产物） 2、营养：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素。添加动物血清（补充合成培养基中缺乏的物质）。培养基： ， ，添加 、 等一些天然成分。 3、温度、PH。温度：36.5±0.5℃，PH=7.2～7.4. 4、气体环境：（1） ：细胞呼吸（2） ：维持培养液的PH. 培养装置：用 或 ，置于95%空气加5%CO2的混合气体的 中培养。 （六）动物细胞培养技术的应用： 1、大规模生产生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体。 2、用于基因工程受体细胞的培养。 3、检测有毒物质。 4、用于生理、病理、药理方面的研究。 5、培养皮肤细胞用于植皮。 （七）植物组织培养与动物细胞培养的比较： 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基 过程 略 略 结果 用途 ①快速繁殖②培养无病毒植物、转基因植物③生产细胞产品 ①生产生物制品如疫苗、干扰素、单克隆抗体②检测有毒物质③研究药理病理。 相同点 三、动物体细胞核移植技术和克隆动物： （一）动物核移植：是将动物的一个细胞的 ，移入一个已经去掉 的卵细胞中，使其重组并发育成一个