GC实验讲义(丹皮酚的测定).docVIP

气相色谱分析的应用（丹皮酚的测定） 一、实验目的 1．了解气相色谱的仪器组成、工作原理以及数据采集、数据分析的基本操作。 2．外标法测定中的含量。 二、实验原理 2-羟基-4-甲氧基苯乙酮C9H10O3），主要来源为牡丹皮。熔点49℃-51℃；易溶于乙醇和甲醇中。具有镇静、催眠、抗菌、抗炎、抗氧化、降血压等作用，气相色谱方法是利用试样中各组份在气相和固定液相间的分配系数不同将混合物分离、测定的仪器分析方法，特别适用于分析含量少的气体和易挥发的液体。当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时，组份就在其中的两相间进行反复多次分配，由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同，因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，按流出顺序离开色谱柱进入检测器，被检测，在记录器上绘制出各组份的色谱峰——流出曲线。在色谱条件一定时，任何一种物质都有确定的保留参数，如保留时间、保留体积及相对保留值等。因此，在相同的色谱操作条件下，通过比较已知标准样和未知物的保留参数或在固定相上的位置，即可对未知物组分进行定性分析。测量峰高或峰面积，采用外标法、内标法或归一化法，可对待测组分的进行定量分析。 典型气相色谱仪主要由气路系统、进样系统、色谱分离系统、温度控制系统、检测系统等五大系统组成，详见本实验附录。 三、仪器与药品 1．仪器设备： 岛津气相色谱仪；ID检测器；毛细柱m）； uL微量注射器；氢气发生器；氮气发生器；2. 药品： ；。 四、实验步骤 1．配制标准溶液：以乙醇为溶剂配制标准溶液，浓度分别为、、g/L 。 2．检查N2 、 H2气源的状态及压力，开启电脑及色谱仪。 3．用微量注射器准确抽取1.0 μL溶液，注射入进样口。注意不要将气泡抽入针筒。在相同的色谱条件下，分别测定标准溶液及未知样品的色谱流出图。计算样品中的含量。 五、问题讨论 1．如何确定色谱图上各主要峰的归属？ 2．哪些条件会影响浓度测定值的准确性？ 附录 典型气相色谱仪简介 典型气相色谱仪由以下五大系统组成：气路系统、进样系统、色谱分离系统、温度控制系统、检测系统、数据处理及其它辅助部件等构成。 一、气路系统： 　　气相色谱仪具有一个让载气连续运行、管路密闭的气路系统。它的气密性，载气流速的稳定性以及测量流量的准确性，对色谱结果均有很大的影响。 1．载气 　　气相色谱中常用的载气有氢气、氮气、氮气和氧气。至于选用何种载气，主要取决于选用的检测器和其它一些具体因素。 气相色谱过程示意图 2．净化器 　　净化器是用来提高载气纯度的装置。净化剂主要有活性炭、硅胶和分子筛、105催化剂，它们分别用来除去烃类杂质、水份、氧气。 3．稳压恒流装置　　由于载气流速是影响色谱分离和定性分析的重要操作参数之一，因此要求载气流速稳定。载气的压力可用压力表来测量，流量用转子流量计指示。 二、进样系统 　　进样系统包括进样装置和气化室。其作用是将液体或固体试样，在进入色谱柱前瞬间气化，然后快速定量地转入到色谱柱中。进样量的大小，进样时间的长短，试样的气化速度等都会影响色谱的分离效率和分析结果的准确性及重现性。 1．进样器 目前液体样品的进样，一般都用微量注射器，常用的规格有1цL、5цL、10цL和50цL等。 2．气化室 为了让样品在气化室中瞬间气化而又不分解，因此要求气化室热容量大，无催化效应。为了尽量减小柱前谱峰变宽，气化室的死体积应尽量可能小。 三、色谱分离系统　　气相色谱仪的分离系统是色谱柱，它由柱管和装填在其中的固定相等所组成。由于混合物各组份的分离在这里完成，所以它是色谱仪中最重要的部件之一。色谱柱可分为填充柱和毛细管。色谱柱的分离效果除与柱长、 柱径和柱形有关外，还与所选用的固定相和柱填料的制备技术以及操作条件等许多因素有关。 四、温控系统 温控系统是用来设定、控制、测量色谱、气化室、检测室的温度。气相色谱的流动相为气体，样品仅在气态时才能被载气携带通过色谱柱，因此，从进样到检测结束为止，都必须控温。同时，温度是气相色谱的重要操作条件之一，直接影响色谱柱的选择性、分离效率和检测器的灵敏度及稳定性。 　气相色谱仪中，多采用可控硅温度控制器连续控制柱的温度。对于沸点范围很宽的混合物，可多采用程序升温进行分析。所谓程序升温是指，在一定的分析周期内，温连续地随时间有低温向高温线性或非线性地变化，以使沸点不同的组份各在其最佳柱温下流出，从而改善分离效果，缩短分析时间。 气化室的温度应使试样瞬时气化而又不分解，其温度一般比柱温高10－50℃。 五、检测器 对流出柱的样品组分进行识别和响应。常见的检测器有热导池检测器、氢火焰离子检测器、电子捕获检测器和火焰光度检测器。 - 3 - 页