SlugsiRNA转染对胰腺癌细胞生长的影响.docVIP

Slug-siRNA转染对胰腺癌细胞生长的影响 崔海宁 张克君* 吴幸 王正文 海南医学院附属医院 普外科 517001 [摘要] 目的 研究Slug基因沉默后对体内胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响 方法 构建靶向抑制Slug的siRNA表达载体，瞬时转染CaPan-2细胞。免疫组织化学、RT-PCR和Western blot法检测细胞Slug表达的变化，MTT检测细胞增殖，Annexin V-FITC/PI、Hoechst33258和PI双染色染色了解细胞凋亡的变化。结果：成功构建了pGenesil-1-Slug-siRNA(pSlug-siRNA)和pGenesil-1-Neg-siRNA (pNeg-siRNA)表达质粒；质粒瞬时转染胰腺癌CaPan-2细胞72h后，细胞内Slug表达受到明显抑制。Slug-siRNA细胞的生长受到抑制，并且细胞凋亡率明显增加 结论：Slug-siRNA抑制Slug表达后可以在体外促进CaPan-2细胞凋亡并抑制细胞的增殖。 关键词： Slug;小干扰RNA;瞬时转染;增殖;凋亡；胰腺肿瘤；CaPan-2 Slug是转录因子家族中编码锌指蛋白的基因Austin,USA、感受态大肠杆菌DH5α购自武汉晶赛生物工程技术公司、限制性核酸内切酶BamHⅠ、HindⅢ、T4连接酶为Promega公司产品、LipofectamineTM2000为In