氯霉素分子印迹聚合物固相微萃取学习指导书.pptVIP

3.4 方法的评价 图3-15 空白牛奶样品添加CAP(1μg/g)直接HPLC分析(1)和 CAP- MIPM- SPME- HPLC分析(2)色谱图 上图是牛奶样品添加1 μg/g直接HPLC分析与经过CAP-MIPM-SPME后进行HPLC分析的色谱图。显然，通过CAP—MIP整体柱提取富集后牛奶中的基质干扰大大降低，且CAP的色谱峰明显升高，即该分析方法对CAP具有很好的选择性提取和富集效果，可以有效去除基质干扰，提高HPLC分析的灵敏度和选择性。 小结 (1)以CAP为模板分子，采用原位聚合法制备了分子印迹聚合物整体柱。通过对合成条件的优化，得到最佳的条件为： CAP:4-VP:EGDMA=1:2:20，甲苯和十二醇为溶剂。 (2)在最佳条件下得到的分子印迹聚合物整体柱对CAP的印迹因子为1.44，对CAP、TAP、MNZ的饱和吸附量分别为164.36、25.06和3.21μg。选择性因子f1=6.6，f2= 51.2。 (3)将其应用于固相微萃取，最佳的MIPM-SPME条件为：上样4mL，上样流速0.2 mL/min; 500 μL水作清洗液，流速为 0.2 mL/min；100 μL甲醇作洗脱液，流速为0.05mL/min。在此条件下测定牛奶中CAP残留，得到CAP在0.05~200μg/g的浓度范围内线性关系良好，检测限(LOD)为17 ng／g，平均加标回收率为97.1％。 Thank you ! * * * 氯霉素分子印迹聚合物整体柱 的制备及其固相微萃取 应用研究 主要内容 实验内容 结果与讨论 3 研究背景 1 2 研究背景 氯霉素（CAP）是一种广谱抗生素，因其具有抗菌性强、药性稳定、价格低廉等优点而被广泛用于畜牧和水产养殖业。但CAP又有抑制人体骨髓造血功能而导致严重的毒副作用，故动物性食品和水产品中的CAP残留对人类健康构成极大的威胁。欧盟和美国均在食品法规中规定CAP的残留限量标准为“零容许量”，随着食品安全越来越受到世界各国及相关国际组织的日益关注，对动物性食品中氯霉素的检测技术也提出了更高的要求。 由于兽药残留分析属复杂基质中痕量组分的分析技术，待测物质浓度低，样品基质复杂，干扰物质多,所以需要对样品进行分离纯化和富集。 整体柱(monolith column)是1989年首次提出的，其制备简单、性能稳定，具有比表面积大、通透性好、传质速度快的优点。将整体柱应用于样品预处理，可以提高萃取容量和萃取效率，缩短萃取时间；也可应用于水溶液样品的提取，生物兼容性好。分子印迹技术选择性高，去除基质干扰效果好，是残留分析研究领域的一个新的发展方向。 鉴于分子印迹技术的高选择性和整体材料的诸多优点，二者结合起来是一个必然的发展趋势，即分子印迹聚合物整体柱技术。 本文以CAP为模板分子，通过对分子印迹聚合物整体柱合成条件的优化，首次在小移液枪枪头里获得了对CAP有选择性提取的分子印迹聚合物整体微柱。并将该整体柱应用于食品中CAP的分离富集，建立了 牛奶中CAP的分析方法，具有选择性高、富集倍数和回收率高的优点。 整体柱 所谓整体柱,又称为棒状柱、连续床层、无塞柱，是一种用有机或无机聚合方法由单体 、引发剂 、致孔剂等混合物在色谱柱内进行原位聚合的连续床固定相。这种色谱柱制备方法简单,由于使用了聚合方法可以往固定相中引入各种可能的作用基团 ，有十分多变的灵活性，同时用原位聚合制得的整体色谱柱要比常规装填的色谱柱具有更好的多孔性和渗透性，具有灌注色谱的特点，即色谱柱中既有流动相的流通孔又有便于溶质进行传质的中孔（几十个纳米）。因而可以对生物大分子进行快速分离 ，而且色谱柱的稳定性很好。 原位聚合法 原位聚合法(in situ polymerization)是一种将模板分子、功能单体、交联剂、引发剂、溶剂按照一定比例混合，然后放在特定的容器(如液相色谱柱、毛细管柱等)中直接聚合。由于该法得到的聚合物，不需要研磨、过筛、沉降等繁琐的处理步骤可以直接用于分析，所以得到了很快的发展。原位聚合法还可以与一些其他的技术如膜、整体柱等技术相结合，制备分子印迹膜(MIM)、分子印迹整体柱等。 实验内容 2.1 实验材料： 氯霉素(CAP， 99.4%) 甲砜霉素(TAP，99%) ，甲硝唑 (MNZ) 乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA，使用前用NaOH溶液 萃取，再用超纯水洗后用无水MgS04干燥） 偶氮二异丁腈(AIBN，使