体外代谢清除率模型用于药物肝代谢过程的研究.docVIP

体外代谢清除率模型用于预测药物肝代谢过程的研究 黄峰 中药学 2110948107 摘 要：本文主要就计算体外代谢清除率的理论与预测模型做一综述，以期使体内药物代谢过程的检测更加准确，并在此基础上可以预测创新药物在体内可能进行的代谢过程，确定其是否适合进行进一步研究开发，为筛选新药提供新的思路。 关键词：代谢清除率；药物代谢动力学；体外模型 前言 药物发现与开发的目标是找出并确定具有药理活性的新化学实体。在过去的几十年里, 药物发现与开发一般方法是在进行药理活性检测后,再对新化学实体进行临床前的动物实验和临床人体试验[1]。近些年随着组合化学和高通量活性筛选技术的发展,已经使人们能够在一周之内筛选的化合物超过10万个[2],从而发现大量具有药理活性的化合物。然而一个化合物最终成为能够上市的药物,必须具备良好的类药属性,即：药效活性、安全性、药代属性和适宜制剂的理化性质。其中,药代属性主要是指化合物能够通过不同生物膜到达作用部位的能力,包括口服生物利用度的高低；以及化合物能否在体内保持一定的浓度水平；与靶受体维持足够时间的结合以产生具有临床意义的药理作用等。药代研究是一项非常复杂的费时费力的工作，是目前加速药物发现阶段研究速度的瓶颈。此外,要在前期阶段了解化合物的药代动力学特征,还有一个重要的原因是考虑开发新药的经济成本,一个新药上市需要投入大量的资金,大约在10~30亿美元之间[3],其间被淘汰化合物的数量也是惊人的,因而可以说大量的资金是投入到那些失败了的化合物。因此,任何能够尽早地揭示化合物的药代动力学特征的研究方式对于降低在高成本的药物开发阶段的失败率是非常有价值的[4]。 肝脏是药物的主要代谢器官,富含参与药物I相代谢和II相代谢的混合功能氧化酶系统,其中90%药物主要是由细胞色素P450酶(cytochromeP-450,CYPs)参与进行生物转化。当前,人肝细胞[3, 4]、肝切片[5]、cDNA表达的基因重组肝药酶系[6]及人肝微粒体[7]等体外模型已被成功用于对体内肝代谢研究的预测。体外代谢研究可排除体内因素干扰,直接观察酶对底物的选择性代谢,为整体试验提供可靠的理论依据。 通过体外数据可估算药物的体内代谢清除率,并可以利用这一药动学参数进一步求算出生物利用度和半衰期,而以上参数对确定其体内药理、毒理作用及患者的顺应性等方面非常重要[8],并对临床上确定第1次给药剂量和给药频率具有十分重要的参考价值[10]。因此,以肝脏为基础的体外代谢预测模型近年来在药物代谢研究中得到广泛应用,本文对这一领域的研究作以下概述。 1 药物代谢清除率临床前预测的理论基础 利用化合物体外代谢数据预测体内清除率的一系列理论,已由Iwatsubo等[11]作了详尽地描述。其预测理论的前提是假设肝代谢是药物的主要清除途径,胆汁分泌及非肝脏清除机制,如肝外代谢和肾分泌等均可忽略。通过体外代谢研究得到一个重要的参数:固有清除率( intrinsic clearance,CLint),再借助于相关转换因子(如比放系数)和体外肝模型,预测估算得到体内的清除率[12]。一般过程如下： 按照酶动力学理论,采用米曼氏方程(Michaelis-Menten equation)可以描述游离药物的代谢速率。CLint由V0/S相比而来,表示药物的代谢速率与酶底物浓度(S)的关系。当药物浓度远远小于Km值时,固有清除率可以表示为: CLint = Vmax / Km （式1-1） Vmax为最大反应速度；Km为米氏常数，表示酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度，使用该方法获得CLint值的前提条件是：所有代谢产物应明确； V0保持恒定时进行测量；药物浓度尚未达到饱和,而且应能代表大部分游离药物的浓度。然而实验前这些条件往往是未知的,目前所得到的CLint值也是代表所有与母药发生作用的酶所体现出的加和值。 然而,在多数情况下,特别是创新药物研究的早期阶段,由于代谢物并不十分清楚,因此,也可以采用另一种方法进行求算,即引入药物的半衰期(T1/2)[13]。同前,假设S《 CLint =0.693V/ T1/2 (式1-2) 在得到固有清除率后，通过比放系数(scaling factor, SF)可将体外测得CLint转换为整个肝脏的清除率。SF比放系数即是一个转换因子, 可看作是酶动力学和药动学参数间的桥梁。如可代表单位重量的肝脏所含微粒体蛋白的量或肝细胞的数目。在肝微粒体实验中, SF常采用的值为每克肝含45 mg微粒体蛋白(大鼠和人)[14]。 预测体内药物代谢清除率的数学模型 肝脏模型可将体外代谢清除率数据用于肝清除率的计算。可用于体内清除率预测的模型很多