第五章 动物卵母细胞与胚胎冷冻保存技术__图文.pptVIP

小鼠 羊 兔 牛 玻璃化冷冻卵母细胞作为核受体的体细胞克隆牛 卵母细胞在超低温冷冻中容易受损部位 膜结构 ：质膜内陷、破裂，胞质与透明带相连，微绒毛数量减少或消失，线粒体分散、膨大，内质网囊池扩张，高尔基复合体消失，细胞基质出现空白区等现象。 染色体 ：处于MII期的成熟卵母细胞其染色体松散地附着在纺锤体上，缺少包被的核膜对低温相当敏感。 细胞骨架 对微丝的影响 微丝是由聚合肌动蛋白和自由肌动蛋白组成，它对纺锤体旋转、极体排出、原核迁移和胞质分裂是必需的。正常情况下，两种肌动蛋白保持平衡，但冷冻保存可能破坏这种平衡 对微管的影响 卵母细胞中的微管主要是参与纺锤体形成。正常情况下，胞质中的微管由α管蛋白和β管蛋白结合组成。微管对温度敏感，0~4℃可引起微管的解降， 人腔前期卵母细胞冷冻后细胞质膜破裂 马卵母细胞玻璃化冷冻后细胞质内线粒体变肿大 胚胎的冷冻保存存在的问题与应用前景 冷冻保存的机理尚不十分清楚 冷冻过程中对细胞超微结构损伤机制的研究较少 冷冻后，如何进行定性和定量分析 使用抗冻保护剂对胚胎均有化学毒性，胚胎冷冻、解冻后体外培养或者移植后效果较差，冷冻保存效果有待提高 技术环节有待于简单化和规范化 谢谢！ The End * * 2. 分类 常用的抗冻保护剂可分为两大类： （1）渗透性抗冻保护剂 在溶液中易结合水分子发生水合作用，使溶液的粘性增加，从而弱化了水