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第六章 细胞工程及其在食品工业中应用 生物科学成为当今世界自然科学的热点和重点,主要由于两方面的原因 一、二十世纪后叶,分子生物学领域一系列突变 性成就,使生命科学在自然科学中的地位发生了革命性的变化。 二、建立在实验室研究基础上 的生物技术的发展为人类带来了巨大的利益和财富。 生物技术将是未来经济发展的新动力 第一次技术革命 工业革命 解放人的双手 第二次技术革命 信息技术 扩展人的大脑 第三次技术革命 生物技术 改造生命本身 主要内容 细胞工程的概念 细胞融合技术 动物细胞工程及应用 植物细胞工程及应用 微生物细胞工程及应用 细胞工程的含义 细胞工程是指在细胞水平上的遗传操作,即通过细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法,快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的技术。 一、细胞融合技术研究进展 二、细胞融合技术含义和意义 细胞融合技术(Cell fusion technology)是指两种不同亲株经酶法除去细胞壁得到两个球状原生质体或原生质体球,然后置于高渗溶液中,在以聚乙二醇(polyethylenegleol)助溶和CaCl2存在下,促使两者互相凝聚集并发生细胞融合,进而导致基因重组,获得新的菌株,这种融合又称为原生质体融合,其融合频率高于常规杂交育种数倍到几十倍。 概念:所谓细胞融合就是指在外力(诱导剂或促融剂)作用下,两个或两个以上的异源(种、属间)细胞或原生质体相互接触,从而发生膜融合、胞质融合和核融合并形成杂种细胞的现象称为细胞融合或细胞杂交。 意义: 细胞融合不受种属的局限,可实现种间生物体细胞的融合,使远缘杂交成为可能,因而是改造细胞遗传物质的有力手段。 它的意义在于从此打破了仅仅依赖有性杂交重组基因创造新种的界限和生殖壁垒,极大地扩大了遗传物质的重组范围;细胞融合技术避免了分离、提纯、剪切、拼接等基因操作,只需将细胞遗传物质直接转移到受体细胞中就能够形成杂交细胞,因而能够提高基因的转移效率。 在技术和仪器设备上的要求不象基因工程那样复杂,投资少,有利于广泛开展研究和推广,并可以进行遗传标记,可促进基因重组,对遗传育种,选育优良品质,达到高产优质具有重要意义。 此外,细胞工程不仅可以在植物与植物之间、动物与动物之间、微生物与微生物之间进行杂交,甚至可以在动物、植物、微生物细胞之间进行融合,形成前所未有的杂交物种。 癌是非常令人恐惧的,人们谈癌色变是因为癌细胞能够无限地生长,甚至可以在病人身上长到几十千克。如果不切除,它还会继续长下去,直到癌细胞将正常的组织所需的养分全部掠夺从而把病人折磨至死。 但是,当癌细胞离开人体后,这一特性却能够变害为益。现代免疫学早已查明,一种抗体是由一种B淋巴细胞产生的,人体内约有一亿种不同的B淋巴细胞,可产生一亿种不同的抗体。 单克隆抗体应用十分广泛,被人们誉为对付癌症的“生物导弹”。如采用抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或毒素相结合,注入体内同癌细胞结合,能在原位杀死癌细胞,而对其它正常细胞则毫无损伤,因此,单克隆抗体还被喻为“抗癌明星”。单克隆抗体本身也可以起到治疗作用,比如,注射乙肝病毒的单克隆抗体可以达到预防乙肝的目的。 二、细胞融合技术意义 生物技术发展至今,细胞成了科学家们随意发挥想像力的乐园,甚至可以把生命像积木那样组装起来,进行细胞水平上的生命组合游戏。 最具代表的是美国耶鲁大学教授克莱白特等的杰作。在黑毛鼠、白毛鼠、黄毛鼠的受精卵分裂成8个细胞时用特制的吸管把8细胞胚吸出输卵管,然后用一种酶将包裹在各个胚胎上的粘液溶解,再把这三种鼠的8细胞胚放在同一溶液中使之组装成一个具有24个细胞的“组装胚”。再把“组装胚”移植到老鼠的子宫内,不久,一只奇怪的组装鼠问世,鼠全身披着黄、白、黑三种不同颜色的皮毛。 迄今为止,英国和美国还组装成功了绵羊和山羊的嵌合体——绵山羊。据说,世界各国科研人员热情高涨,正在组装“五位一体”、“六位一体”的生物。 三、细胞融合的方法和步骤 诱导细胞融合的方法有三种: (一)生物方法(病毒) 采用病毒促进细胞融合,如仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusion protein),可介导病毒同宿主细胞融合,也可介导细胞与细胞的融合。 (二)化学方法(聚乙二醇PEG) (三)物理方法(电激和激光)。 化学和物理方法可造成膜脂分子排列的改变,去掉作用因素之后,质膜恢复原有的有序结构,在恢复过程中便可诱导相接触的细胞发生融合。 三、细胞融合的方法和步骤 步骤举例:人、鼠细胞融合实验分三步进行∶ 第一步、首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗
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